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肝细胞癌是一种常见的恶性肿瘤,化学治疗是晚期肝细胞癌患者的主要治疗手段。但化疗药物给药后只有少数能够达到靶组织,限制了其疗效的发挥,因此,为了实现药物在肿瘤部位的靶向递送和蓄积,靶向递送系统的构建至关重要。巨噬细胞因具有肿瘤归巢能力、抗肿瘤药物耐受性、独特的吞噬能力、以及潜在的免疫治疗能力等诸多优点而备受关注。已经有多项研究利用其作为细胞载体,取得了良好的抗肿瘤治疗效果。然而,如何控制巨噬细胞中药物在肿瘤部位定位释放的同时发挥巨噬细胞的免疫治疗作用仍是目前设计面临的难点。为解决上述问题,我们提出光定位控释策略,选择光作为控制药物释放的外部刺激。邻硝基苄基是常见的光响应基团,含有邻硝基苄基的两亲性嵌段共聚物构建的光响应胶束,可在365nm紫外光（Ultraviolet,UV）的照射下,发生裂解,触发药物释放。此外,一定程度的UV能促进巨噬细胞产生外泌体,促进药物外排。但是,UV较弱的穿透能力导致其应用受限,而具有强组织穿透性,高安全性的近红外（Near infrared,NIR）恰能弥补其不足。因此利用上转换纳米粒,将NIR转换为UV,两者结合,实现巨噬细胞中药物在肿瘤部位的定位释放。基于上述策略,本论文选择聚环氧乙烷和甲基丙烯酸硝基苄酯合成含有邻硝基苄基的两亲性嵌段共聚物,制备光响应载药纳米粒,用以构建光定位控释纳米-巨噬细胞递药系统,可在穿透性强的NIR刺激下触发药物释放,继而通过UV促进巨噬细胞产生的外泌体实现药物外排。巨噬细胞可塑性强,易被肿瘤微环境驯化为M2型,此外,肿瘤部位的肿瘤相关巨噬细胞也多为M2型,促进肿瘤发展。IMD 0354是一种疏水性IKKβ抑制剂,可作用于NF-κB通路,极化载体巨噬细胞和肿瘤相关巨噬细胞为M1型,改善肿瘤微环境的免疫抑制状态,抑制肿瘤生长。索拉非尼（Sorafenib,SF）是用于晚期肝癌患者的一线化疗药物,既可抑制肿瘤细胞增殖,又可抑制肿瘤血管生成,有效杀伤恶性肿瘤。因此,本论文选择IMD 0354用以极化巨噬细胞和肿瘤相关巨噬细胞,在保持巨噬细胞活性的同时发挥其细胞治疗作用,协同化疗药物索拉非尼,有效杀伤肿瘤。综上,本论文基于光定位控释策略,合成了两亲性嵌段共聚物,共负载索拉非尼、IMD 0354和上转换纳米粒。通过与巨噬细胞孵育被巨噬细胞摄取,构建了光响应的纳米-巨噬细胞药物递送系统,用于肝细胞癌治疗。利用巨噬细胞的天然靶向能力实现药物的靶向递送。NIR被上转换纳米粒转化为UV后,触发药物在肿瘤部位定位释放,促进药物外排。释放的IMD 0354同时极化载体巨噬细胞和肿瘤相关巨噬细胞为M1型,使其发挥免疫治疗效果,增强T细胞免疫,改善肿瘤微环境,联合SF的肿瘤杀伤作用,显著遏制肿瘤生长。本研究主要研究内容和结果如下:1.索拉非尼和IMD 0354含量测定方法的建立SF和IMD 0354的含量测定方法通过高效液相色谱法建立,且均在一定浓度范围内线性良好,日内、日间精密度、方法回收率均符合测定要求。2.共载索拉非尼和IMD 0354光定位控释纳米-巨噬细胞药物递送系统的制备及表征首先合成了 UV响应性的两亲性嵌段共聚物PNB并制备共负载UCNP,SF以及IMD 0354的NIR光响应载药纳米粒USIP。通过1H-NMR和GPC验证了PNB的成功合成。纳米粒USIP粒径均匀,形态圆整,分散性良好。通过体外共孵育的方式制备了 USIP@M,并确定了 USIP的最佳孵育浓度为SF 200μg/mL和最佳孵育时间2 h。通过活死细胞实验验证了光毒性,结果表明NIR光照不会对USIP@M造成明显损伤。通过释放形式考察,表明部分会通过外泌体的形式释放,且光响应释放药物后能够促进巨噬细胞向促炎M1表型极化。3.共载索拉非尼和IMD 0354光定位控释纳米-巨噬细胞药物递送系统的体外摄取及体内外靶向递送行为评价考察了 H22细胞对NIR照射后UCP@M释放液的体外摄取行为,结果表明表明UCP@M+L的释放液能够更好的入胞,显著促进H22肿瘤细胞的摄取;利用Transwell实验和小动物成像实验证明了 USIP@M具有很好的体内外肿瘤靶向能力,在肿瘤组织中能够很好的募集和浸润。肿瘤深层渗透能力考察表明NIR光的照射能够促进UCP@M的肿瘤深层渗透。4.共载索拉非尼和IMD 0354光定位控释纳米-巨噬细胞药物递送系统的药效学和安全性评价以H22为细胞模型,通过体外细胞毒实验考察USIP@M的体外抗肿瘤作用,以荷H22的Balb/c为动物模型考察USIP@M的体内抗肿瘤作用。细胞毒性实验和体内药效学实验表明USIP@M+L能够将SF的肿瘤杀伤作用、IMD 0354的免疫激活作用和巨噬细胞的免疫治疗作用联合,显著遏制肿瘤生长,抗肿瘤效果显著。测定了瘤内TAM、CTL、Treg和T细胞的数量以及血清中促炎因子以及抗炎因子的水平变化,结果表明USIP@M+L可有效极化TAM为M1型,并有效改善肿瘤微环境。溶血实验和小鼠主要脏器的H＆E染色证明了 USIP@M+L的初步安全性良好。