【摘 要】
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Cbl(Casitas B-lineage lymphoma)是一类广泛分布的细胞内蛋白,属于泛素连接酶E3,由N-端保守的TKB和RING结构域以及其它蛋白-蛋白结合模体组成。Cbl分子中的TKB及其他结构域
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Cbl(Casitas B-lineage lymphoma)是一类广泛分布的细胞内蛋白,属于泛素连接酶E3,由N-端保守的TKB和RING结构域以及其它蛋白-蛋白结合模体组成。Cbl分子中的TKB及其他结构域可以识别并结合靶蛋白,RING结构域负责募集泛素结合酶E2,从而启动泛素化降解途径。Cbl以这种方式参与细胞内信号转导的负向调控,这对于维持细胞的内稳态具有重要作用。Cbl突变后可成为癌蛋白;许多肿瘤细胞则表现为与增殖有关的分子(如受体型蛋白酪氨酸激酶,RTK)因发生突变或其它遗传学改变不受Cbl负调控。这些现象提示,加强或重建Cbl的负调控作用,或许能够从受体活化的上游信号开始抑制肿瘤细胞增殖。 为利用Cbl的泛素连接酶活性,并使其能够特异性地降解某些信号转导分子,从而对一些与肿瘤生长有关的细胞增殖进行负向调节,我们构建了数个重组嵌合Cbl分子截短体。这些嵌合分子既保留了Cbl泛素连接酶活性所需要的Cbl N端(包含TKB与RING结构域),并且TKB中原有的SH2分别置换为可以结合癌相关蛋白EGFR或HER2并且介导其活化信号的下游信号分子Grb2、Grb7、p85及Src的SH2。因此将改构后的重组Cbl泛素连接酶分别命名为:Cbl-Grb2(SH2)-RING、Cbl-Grb7(SH2)-RING、Cbl-src(SH2)-RmG
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