TGF-β3缓释组织工程滑膜鞘的研制

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一、研究背景屈指肌腱损伤后愈合发生粘连常常导致手指的关节活动受限,目前仍是手外科术后常见的并发症,往往需要再次手术治疗。尽管随着材料和手术技术、康复手段的进步,如何减少肌腱损伤愈合后粘连仍然面临挑战。研究发现有滑膜鞘肌腱在抗粘连方面明显优于无滑膜鞘肌腱,滑膜鞘通过分泌滑液给肌腱提供营养,同时通过自身分泌的细胞因子来减少瘢痕形成,但其数量少、取材会对局部组织造成损伤,如果使用人工肌腱也面临着免疫排斥反应等问题。如果我们对无滑膜鞘或滑膜鞘损伤的肌腱给予人工化改造,制备组织工程滑膜鞘,将有可能大大减少肌腱损伤愈合后粘连问题。近年来,转化生长因子-β (transforming growth factor-β,TGF-β)家族在瘢痕形成过程中的作用被越来越重视,TGF-β被认为是肌腱损伤后粘连、瘢痕形成的关键因子。研究发现在皮肤损伤愈合过程中,加入转化生长因子TGF-β1,2的中和抗体或增加TGF-β3的量能有效减少瘢痕的形成。TGF-β3在减少瘢痕形成的治疗中被认为是有效和可行的。壳聚糖是几丁质部分脱乙酰基的产物,在自然界中广泛存在,壳聚糖溶液中带有高密度的正电荷,可以与多种水溶性的阴离子物质结合,并可以用来制备壳聚糖微球、纤维和多孔支架。壳聚糖具有良好的生物相容性和生物可降解性,在体内可被溶菌酶等酶解成低聚糖,降解产物能被生物体完全吸收。本研究拟利用壳聚糖微球负载TGF-3,构建负载缓释TGF-3微球的壳聚糖组织工程支架,然后种植滑膜细胞,构建TGF-3缓释组织工程滑膜鞘,并检测其生物相容性。本研究将为肌腱粘连的防治提供新的理论依据和实验基础,将可能为临床手外科屈指肌腱粘连的防治提供有效的方法。二、研究目的通过制备负载转化生长因子β3(TGF-β3)的缓释组织工程滑膜鞘,探索减少肌腱损伤愈合后粘连的新方法。三、研究内容1.采用乳化交联法制备负载TGF-β3的壳聚糖缓释微球,扫描电镜观察并检测其体外缓释效果。2.利用冷冻干燥法制备壳聚糖三维支架,将壳聚糖微球引入支架,扫面电镜观察。3.将滑膜细胞收集后种植于含TGF-β3微球的壳聚糖三维支架,MTT法检测微球和支架材料对滑膜细胞增殖的影响,检验材料和细胞的体外相容性。四、结果1.壳聚糖微球扫描电镜下观察呈球状,平均粒径28.5±4.3μ m。2.对微球缓慢释放TGF-3进行连续监测7天,累积总释放率为46.2%±0.3%。3.壳聚糖三维支架扫面电镜观察孔隙较为一致,孔隙直径平均180.4±35.3μ m,孔隙率83.2%±0.6%。微球可均匀扩散并嵌入到支架中。4.滑膜细胞在支架和微球间生长良好。MTT法检测TGF-β3微球和支架不影响滑膜细胞正常生长增殖,材料体外相容性较好(p>0.05)。五、结论本研究验证了负载TGF-β3的微球体外缓释效果良好,材料和滑膜细胞具有良好的生物相容性,组织工程滑膜鞘为减少肌腱损伤愈合后粘连提供了新方法。
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