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目的:1.体内、体外实验探讨p53在顺铂诱导的急性肾损伤（AKI）中的表达及作用。2.体内、体外实验证实p53调控microRNA-142-5p（miR-142-5p）加重顺铂诱导的急性肾损伤（AKI）。3.探讨p53调控microRNA-142-5p加重顺铂诱导急性肾损伤的作用及机制。方法:1.在体内实验中:30mg/kg顺铂经小鼠腹腔注射建立急性肾损伤（AKI）模型,分别24h和48h利用Western Blot检测p53表达水平,免疫组化检测p53表达位置和水平。2.2 mg/kg p53抑制剂pifithrin-α治疗顺铂诱导的急性肾损伤小鼠,肌酐和尿素氮试剂盒,定量检测血清肌酐（Cr）,血尿素氮（BUN）;分别以苏木精-伊红（HE）染色,过碘酸雪夫染色（Periodic Acid-Schiff stain）和肾小管标志物钙粘附蛋白E（E-cadherin）免疫组化染色评估肾组织损伤情况;TUNEL染色和凋亡蛋白caspase3免疫荧光染色检测肾小管上皮细胞凋亡。体外实验中:10μmol/L顺铂处理人肾小管上皮细胞（HK-2）,分别24h和48h利用Western Blot检测p53表达水平,免疫荧光染色检测p53表达位置和水平;10 μmol/L p53抑制剂pifithrin-α处理顺铂诱导的肾小管上皮细胞,免疫荧光检测肾小管标志物E-cadherin;Hoechst染色和Western Blot检测评估肾小管上皮细胞凋亡。2.在体内实验中,顺铂诱导的急性肾损伤模型中提取小鼠的肾脏组织,进行miR测序,分析miR的表达情况,并进行生物信息学分析。逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）来检测顺铂诱导的急性肾损伤组织中miR-142-5p的表达水平。荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization,FISH）检测 miR-142-5p 在肾组织中的表达位置。p53抑制剂Pifithrin-α和顺铂经腹腔注射入小鼠体内,RT-PCR检测肾组织miR-142-5P表达。在体外实验中,p53抑制剂pifithrin-α和顺铂处理人肾小管上皮细胞,RT-PCR检测miR-142-5p 表达;miR-142-5p 抑制剂 Anti-miR-142-5p-LNA 和 miR-142-5p过表达试剂miR-142-5pmimic转染顺铂治疗的肾小管上皮细胞,采用细胞明场图像、Hoechst染色、TUNEL染色等观察肾小管上皮细胞凋亡情况;p53抑制剂pifithrin-α和miR-142-5p抑制剂Anti-miR-142-5p-LNA同时干预顺铂刺激的肾小管上皮细胞,Hoechst和TUNEL染色观察细胞凋亡情况。3.TargetScan软件预测miR-142-5p潜在靶点为SIRT7并用荧光素酶标记实验证实,Western Blot检测转染miR-142-5pmimic的肾小管上皮细胞细胞在顺铂治疗后SIRT7表达。Western Blot检测干预SIRT7后肾小管上皮细胞的凋亡蛋白caspase3及NF-κB表达,Western Blot进一步检测抑制p53和过表达miR-142-5p后肾小管上皮细胞NF-κB表达。4.所有数据均以均值±标准差（Mean±SD）表示。所有数据用SPSS 17.0进行统计学分析。各组间的比较采用单因素方差分析,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果:1.体内实验Western Blot分析结果显示顺铂治疗后肾脏中p53表达较对照组显著升高,免疫组化染色进一步表明p53大部分位于肾小管上皮细胞核,顺铂治疗后其阳性表达率较对照组升高（P＜0.05）。顺铂诱导的急性肾损伤小鼠血清肌酐及尿素氮水平较对照组显著升高,pifithrin-α治疗顺铂诱导的急性肾损伤小鼠,其血清肌酐及尿素氮水平较顺铂组降低（P＜0.05）。HE染色显示:顺铂组较对照组肾小管损伤明显加重,pifithrin-α治疗顺铂诱导的急性肾损伤小鼠后肾小管损伤较顺铂明显减轻,与其结果一致的是,PAS染色结果亦显示顺铂组肾小管损伤较对照组明显加重,pifithrin-α治疗顺铂诱导的急性肾损伤小鼠后肾小管损伤较顺铂明显减轻;E-cadherin免疫组化结果显示顺铂组肾小管损伤后上皮细胞标志物E-cadherin较对照组明显减少,pifithrin-α治疗顺铂诱导的急性肾损伤小鼠后肾小管上皮细胞标志物E-cadherin逐渐恢复（P＜0.05）。TUNEL染色结果显示:顺铂治疗组较对照组的肾组织中肾小管上皮细胞凋亡率明显加重,pifithrin-α治疗顺铂诱导的急性肾损伤小鼠后肾小管上皮细胞凋亡明显减轻;caspase3免疫荧光染色进一步证实顺铂组肾小管上皮细胞凋亡率较对照组明显加重,pifithrin-α治疗顺铂诱导的急性肾损伤小鼠后肾小管上皮细胞凋亡明显减轻（P＜0.05）。体外实验Western Blot分析结果显示顺铂治疗后肾小管上皮细胞中p53表达较对照组显著升高（P＜0.05）,免疫荧光染色进一步表明p53大部分位于肾小管上皮细胞核,顺铂治疗后其阳性表达率较对照组升高。免疫荧光结果表明顺铂组的肾小管上皮细胞标志物E-cadherin较对照组明显减少,pifithrin-α治疗顺铂诱导的损伤肾小管上皮细胞后肾小管上皮细胞标志物E-cadherin逐渐恢复。Hoechst染色结果表明顺铂组的肾小管上皮细胞凋亡率较对照组明显增加,pifithrin-α治疗顺铂诱导的损伤肾小管上皮细胞后肾小管上皮细胞凋亡率降低;Western Blot进一步证实顺铂组的肾小管上皮细胞caspase3表达较对照组明显增加,pifithrin-α治疗顺铂诱导的损伤肾小管上皮细胞后肾小管上皮细胞caspase3表达降低（P＜0.05）。2.RNA基因测序结果显示:miR在顺铂诱导的急性肾损伤模型组中与对照组中相比发生了显著差异。其中24个microRNAs基因下调,42个microRNAs基因上调。RT-PCR显示顺铂治疗的肾组织中miR-142-5p表达量较对照组显著降低（p＜0.05）。FISH结果表明miR-142-5p位于肾脏的肾小管细胞质和细胞核。抑制肾脏中p53表达,miRNA-142-5p在顺铂诱导的损伤肾组织中表达显著上调;抑制肾小管上皮细胞中p53表达,miRNA-142-5p在损伤的肾小管上皮细胞中表达亦显著上调（P＜0.05）。miR-142-5p抑制剂Anti-142-5p-LNA转染顺铂治疗的肾小管上皮细胞,细胞明场可以看出细胞凋亡较顺铂组显著增加;Hoechst染色证实miR-142-5p抑制剂Anti-142-5p-LNA转染顺铂治疗的肾小管上皮细胞后肾小管上皮细凋亡增加。miR-142-5p过表达试剂miR-142-5p mimic转染顺铂治疗的肾小管上皮细胞,TUNEL染色可以看出细胞凋亡较顺铂组显著减少;Hoechst染色证实miR-142-5p过表达试剂miR-142-5p mimic转染顺铂治疗的肾小管上皮细胞后肾小管上皮细胞凋亡减少（P＜0.05）。p53抑制剂pifithrin-α和miR-142-5p抑制剂Anti-142-5p-LNA同时干预顺铂治疗的肾小管上皮细胞,Hoechst和TUNEL染色结果表明肾小管上皮细胞凋亡率较pifithrin-α治疗组升高（P＜0.05）。3.TargetScan软件预测miR-142-5p与SIRT7有潜在结合位点,荧光素酶标记实验进一步证实miR-142-5p与SIRT7存在结合位点,miR-142-5p过表达试剂miR-142-5p mimic转染顺铂治疗的肾小管上皮细胞后肾小管上皮细胞SIRT7表达降低（P＜0.05）。Western Blot结果表明下调SIRT7表达抑制顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡蛋白caspase3及NF-κB表达。Western Blot结果进一步表明p53抑制剂pifithrin-α和miR-142-5pmimic均能抑制顺铂诱导的肾小管上皮细胞NF-κB 表达（P＜0.05）。结论:1.p53在顺铂诱导的急性肾损伤中表达升高,抑制p53能够抑制顺铂诱导的肾功能恶化,减轻肾小管损伤和肾脏的结构破坏,减少肾小管上皮细胞凋亡。2.p53抑制顺铂诱导的肾损伤中miR-142-5p表达,而抑制p53表达能够上调损伤的肾小管上皮细胞中miR-142-5p表达,过表达miR-142-5p减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤。3.miR-142-5p通过直接靶向SIRT7影响NF-κB信号通路保护顺铂诱导的急性肾损伤。