硫酸酯化黑木耳NTAAP多糖片段与松多酚协同抗氧化研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:lzayy9
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机体氧化作用是引发如癌症、动脉硬化、心脑血管等相关疾病的主要诱因之一。因此对抗氧化剂的研究与开发一直备受关注。由于机体内的抗氧化作用途径复杂且多变,单一的抗氧化剂很难达到理想的抗氧化效果。为了提高现有抗氧化剂的高效性,本研究选择了具有大量多糖类物质的黑木耳和富含多酚类化合物的红松树皮作为主要原料,将黑木耳多糖分成多个片段进行活性跟踪,并对体现出具有较高抗氧化活性的分级多糖进行硫酸化修饰,再将黑木耳分级多糖和硫酸化多糖片段分别与红松多酚进行联合使用,通过体外和体内实验对联合用药进行抗氧化分析。具体内容与研究结果如下:1.选用三种不同溶液(纯水、0.1mol/L的盐酸和0.1mol/L氢氧化钠)浸提提取黑木耳多糖,再将提取出的黑木耳多糖用不同浓度乙醇沉淀出不同的黑木耳分级多糖,并对各分级多糖进行体外抗氧化活性分析。得出结论:NTAAP90%的体外抗氧化活性最强。2.采用浓硫酸法对选出的最佳分级多糖片段进行分子修饰,并优化出制备硫酸化黑木耳多糖的最佳工艺条件,根据优化工艺结果选择制备条件为:反应时间1h,反应温度-2℃,反应试剂比例为1:3,得到硫酸化多糖取代度为0.5170。并经红外光谱显示,NTAAP90%经过硫酸化成功接上硫酸基团。3.分别测得单独作用时的体外抗氧化指标(ABTS自由基清除活性、OH自由基清除活性、超氧自由基的清除活性以及脂质过氧化的抑制活性)的IC50值,以组成复配组的活性物质的IC50值的比值作为参考,选择50:1、100:1、150:1三个比例作为ComboNP和ComboSP的相互作用分析。用药物联合分析软件"CompuSyn"处理得到结果:ComboNP的ABTS自由基清除活性的测定显示为拮抗作用,对超氧自由基的清除活性和对脂质过氧化的抑制活性体现出了轻度的协同效果。而ComboSP显现出较好的清除ABTS自由基和超氧自由的协同效果,并在抑制脂质过氧化活性方面体现出,其相互作用与SNTAAP90%和PP的比例有明显的关联,在SNTAAP90%和PP以150:1的比例复配时,ComboSP呈现出强协同作用。4.通过对小鼠采用60Co-γ射线辐射,建立氧化损伤模型,研究ComboSP对小鼠抗氧化体内网络作用。结果显示ComboSP能够有效的阻止DNA弥散,并降低小鼠体内脂质过氧化产物MDA的水平,增强了抗氧化物质(GSH. VE. VC和COQ10)的合成与再生。表明了ComboSP能够对电离辐射损伤进行有效的防护。本研究将自身具有一定抗氧化能力的黑木耳分级多糖进行硫酸酯化修饰,再将硫酸化后的黑木耳分级多糖与红松多酚进行复配研究,得到具有强协同作用的复配物,并经体内实验得以证明。此发现对于揭示抗氧化途径具有一定的理论价值,对进一步开发天然高效的抗氧化剂具有现实意义。
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