【摘 要】
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大黄鱼（Larimichthys crocea）是我国重要的海洋经济鱼类,被农业部列为最具优势的八大出口水产品之一。近年来随着大黄鱼养殖产业的快速发展,大黄鱼病害日益严重。由刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans）感染引起的体表白点病是对大黄鱼养殖产业危害最严重的疾病之一,目前还缺乏安全有效的防治手段。近年来免疫防治措施受到了广泛重视,为了能够对大黄鱼病害进行有效的免疫防治,对大黄
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大黄鱼（Larimichthys crocea）是我国重要的海洋经济鱼类,被农业部列为最具优势的八大出口水产品之一。近年来随着大黄鱼养殖产业的快速发展,大黄鱼病害日益严重。由刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans）感染引起的体表白点病是对大黄鱼养殖产业危害最严重的疾病之一,目前还缺乏安全有效的防治手段。近年来免疫防治措施受到了广泛重视,为了能够对大黄鱼病害进行有效的免疫防治,对大黄鱼免疫系统及其功能的研究就显得尤为重要。免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）是鱼类体液免疫应答的主要效应分子,在鱼类免疫中扮演着重要的角色,但目前对于IgM和IgT在刺激隐核虫感染过程中的功能还知之甚少。本论文建立了大黄鱼人工感染刺激隐核虫的动物模型,分析了感染刺激隐核虫后大黄鱼头肾、脾脏和外周血中IgM和IgT在转录水平和蛋白水平的变化以及B细胞的增殖情况。具体研究结果如下:1、研究了健康大黄鱼不同组织中IgM和IgT重链基因的转录表达情况,发现IgM和IgT重链基因呈组成性表达,其中IgM重链基因在皮肤中表达量最高,在外周血中表达量最低;IgT重链基因在鳃中表达量最高,在外周血中表达量最低。2、研究了刺激隐核虫感染后大黄鱼头肾和脾脏中IgM和IgT重链基因的转录表达情况,发现头肾中IgM重链基因在感染后第7天和第60天极显著上调,IgT重链基因在感染后第7天极显著上调;脾脏中IgM重链基因在感染后第4天和第60天极显著上调,IgT重链基因在感染后第4天和第21天极显著上调。3、研究了刺激隐核虫感染后大黄鱼头肾和脾脏中IgM和IgT蛋白水平的变化,发现头肾中大黄鱼IgM蛋白在感染后第28天极显著增加,IgT蛋白在感染后第4天、第7天和第35天极显著增加;脾脏中IgM蛋白在感染后第4天、第7天和第42天极显著增加,IgT蛋白在感染后第21天极显著增加。4、刺激隐核虫感染后,研究了大黄鱼不同天数血清IgM和IgT蛋白浓度的变化。发现在感染第4天和第7天后,血清中IgM浓度极显著增加,但寄生虫特异性IgM浓度除了第4天比对照组显著增加外其它时间点无显著性差异;在感染第42天和第60天后,血清中IgT浓度极显著增加,而在感染第49天和第60天后,血清中寄生虫特异性IgT浓度极显著增加。5、刺激隐核虫感染后,研究了大黄鱼头肾、脾脏和外周血IgM+B和IgT+B细胞中Ed U+细胞的比例。发现感染7天后IgM+B和IgT+B细胞在外周血中极显著增殖;感染21天后IgM+B和IgT+B细胞在头肾中极显著增殖;感染35天后IgT+B细胞在脾脏中极显著增殖;感染49天后IgM+B细胞在头肾中极显著增殖。综上所述,本研究表明大黄鱼IgM和IgT在刺激隐核虫感染过程中发挥了重要作用,研究结果不仅对于深入认识鱼类抗刺激隐核虫感染的免疫机制具有重要意义,也为刺激隐核虫高效疫苗设计提供理论依据。
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