【摘 要】
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目的:探讨加味补阳还五汤治疗肺纤维化的临床效果,以及从细胞水平和信号通路角度,探究加味补阳还五汤干预肺纤维化的具体作用机制和靶点,以期为肺纤维化的治疗提供新的思路。方法:1.临床研究:随机将纳入研究的32例IPF患者分为2组,以吡非尼酮为对照,加味补阳还五汤为观察组。治疗周期均为12周,比较两组患者治疗前后的呼吸困难评分、指端氧饱和度、肺功能中FVC和DLco、圣乔治呼吸问卷评分等指标,探讨加味补
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目的:探讨加味补阳还五汤治疗肺纤维化的临床效果,以及从细胞水平和信号通路角度,探究加味补阳还五汤干预肺纤维化的具体作用机制和靶点,以期为肺纤维化的治疗提供新的思路。方法:1.临床研究:随机将纳入研究的32例IPF患者分为2组,以吡非尼酮为对照,加味补阳还五汤为观察组。治疗周期均为12周,比较两组患者治疗前后的呼吸困难评分、指端氧饱和度、肺功能中FVC和DLco、圣乔治呼吸问卷评分等指标,探讨加味补阳还五汤对肺纤维化的临床治疗效果。2.细胞实验:用TGF-β1诱导PMVECs,PMVECs随机分为8组:1组（空白组）、2组（模型组）、3组（空白血清组）、4组（补阳还五汤含药血清组）、5组（加味补阳还五汤含药血清低浓度组）、6组（加味补阳还五汤含药血清中浓度组）、7组（加味补阳还五汤含药血清高浓度组）、8组（吡非尼酮含药血清组）,用Transwell检测各组细胞迁移能力,Tube Formation法测管腔形成,Western Blot检测p-ERK1/2蛋白表达,Elisa法检测VEGF、IL-6,PCR检测ERK1/2mRNA、MEK1/2mRNA、CREBmRNA、VEGFR2mRNA。结果:1.临床研究:治疗前两组患者年龄、性别、病程等基线资料及各观察指标无明显差异,具有可比性。治疗后,加味补阳还五汤组患者呼吸困难评分、圣乔治呼吸问卷评分均有所改善,而SpO2、DLco、FVC等客观指标无明显变化。治疗期间,患者未出现明显不良反应和副作用。总有效率为87.5%。吡非尼酮组与治疗前比,呼吸困难评分、SpO2、DLco、FVC均无明显改善,而圣乔治呼吸问卷评分较治疗前升高,提示患者生活质量有所下降。有一例患者在治疗期间出现日光性皮炎。治疗有效率为62.5%。2.细胞实验:（1）TGF-β1诱导PMVECs,MAPK/ERK1/2通路关键蛋白MEK1/2mRNA、ERK1/2mRNA、p-ERK1/2表达均升高,表明MAPK/ERK1/2信号通路被激活;（2）TGF-β1诱导PMVECs,细胞迁移、小管形成增加,促血管生成因子VEGF、VEGFR2mRNA、CREBmRNA、IL-6水平均升高,表明PMVECs血管新生模型已建立;（3）补阳还五汤含药血清、加味补阳还五汤含药血清、吡非尼酮含药血清均有一定抑制MAPK/ERK1/2通路,降低促血管生成因子VEGF、VEGFR2mRNA、CREBmRNA、IL-6表达,抑制细胞迁移、小管形成的趋势;（4）加味补阳还五汤含药血清各浓度组成一定量效趋势,高浓度组的作用要优于低、中浓度组;（5）加味补阳还五汤含药血清高浓度组抑制MAPK/ERK1/2通路,降低促血管生成因子表达,抑制细胞迁移和小管形成的作用优于补阳还五汤含药血清组;（6）加味补阳还五汤含药血清各浓度组与吡非尼酮含药血清组相比,作用各有侧重。结论:加味补阳还五汤治疗IPF的临床疗效优于吡非尼酮,能减缓患者呼吸困难的症状,改善患者生活质量,且用药安全,无明显不良反应和副作用,但对患者SpO2、FVC、DLco等客观指标改善不明显。细胞实验证明加味补阳还五汤含药血清可以减少VEGF、VEGFR2mRNA、CREBmRNA、IL-6等促血管生成因子的表达,降低MAPK/ERK1/2通路标志蛋白ERK1/2mRNA、MEK1/2mRNA的转录水平及ERK1/2的磷酸化水平,推测加味补阳还五汤含药血清可能通过抑制MAPK/ERK1/2信号通路,下调促血管生成因子VEGF、VEGFR2mRNA、CREBmRNA、IL-6的水平,减少血管新生和重塑,从而延缓肺纤维化进程。
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