目的研究前列腺素类药物的使用对兔结膜全层厚度及对结膜淋巴管增生的影响。并研究针刺兔眼周穴位后,房水中内源性前列腺素表达水平的变化,据此推测针刺降低青光眼眼压的可能机制。方法1.清洁级新西兰兔按性别与体重随机分为拉坦前列腺素实验组、盐酸卡替洛尔对照组与空白对照组,每组8只。实验前,用OCT分别测量并记录拉坦前列腺素实验组与盐酸卡替洛尔对照组的结膜全层厚度,每组分别滴药2个月后,再次测量并记录两组的结膜全层厚度,比较给药前后结膜全层厚度的变化,并做统计学分析。2.利用Western Blot、RT-PCR、免疫组化等实验技术分析实验前后各组结膜组织中MMP-1、MMP-3蛋白与m RNA表达水平的变化。3.利用Western Blot、RT-PCR、免疫荧光等实验技术分析实验后拉坦前列腺素实验组较空白对照组结膜淋巴管的标记酶5’-Nase与毛细血管的标记酶ALPase蛋白与m RNA表达水平的变化;利用5’-Nase-ALPase酶组织化学染色技术鉴别结膜淋巴管与结膜毛细血管,并在显微镜下观察结膜淋巴管在结膜组织中的分布与走形规律。4.依次选取双侧睛明穴、太阳穴、瞳子髎穴进行针刺,每穴留针20min。抽取房水的时间间隔依次为针刺前、针刺后1h、针刺后4h、针刺后8h,ELISA检测各不同时间间隔内房水中内源性前列腺素表达水平的变化。结果1.实验前拉坦前列腺素实验组结膜厚度为178.88±12.03μm,实验后为124.19±11.29μm,实验前后差异有统计学意义(F=309.094,P<0.001);实验前盐酸卡替洛尔对照组结膜厚度为184.94±11.85μm,实验后为183.31±8.7μm,实验前后差异无统计学意义(F=0.195,P=0.662);2.实验后Western Blot结果显示拉坦前列腺素实验组结膜组织中MMP-1的蛋白表达水平较空白对照组中MMP-1的蛋白表达水平升高,且差异有统计学意义(F=26.980,P<0.001);RT-PCR结果显示拉坦前列腺素实验组结膜组织中MMP-1的m RNA表达水平较空白对照组中MMP-1的m RNA表达水平升高,且差异有统计学意义(F=38.131,P<0.001);3.实验后Western Blot结果显示拉坦前列腺素实验组淋巴管的标记酶5’-Nase的蛋白表达水平较空白对照组5’-Nase的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(F=231.175,P<0.001);RT-PCR结果显示拉坦前列腺素实验组淋巴管的标记酶5’-Nase的m RNA表达水平较空白对照组5’-Nase的m RNA表达水平升高,差异有统计学意义(F=84.115,P<0.001);免疫荧光实验技术结果显示拉坦前列腺素实验组淋巴管的标记酶5’-Nase的荧光染色强度高于空白对照组;实验后拉坦前列腺素实验组结膜毛细血管标记酶ALPase的蛋白表达水平较空白对照组ALPase的蛋白表达水平无明显变化,差异无统计学意义(F=1.247,P=0.788);酶组织化学染色观察发现,结膜淋巴管染色呈棕色,结膜毛细血管染色呈蓝色,两种组织结构因此得以区分;4.ELISA结果显示针刺后1h、针刺后4h、针刺后8h房水中内源性前列腺素的表达水平较针刺前房水中内源性前列腺素的表达水平升高,且在针刺后4h房水中内源性前列腺素的表达水平达到最高,较空白对照组房水中内源性前列腺素的表达水平差异有统计学意义(F=56.561,P<0.001);结论1.前列腺素类药物的使用可使兔结膜厚度变薄。结膜组织中MMP-1蛋白表达水平的升高可能是导致结膜厚度变薄的原因之一。2.前列腺素类药物的使用上调结膜淋巴管标记酶5’-Nase的表达;外源性前列腺素可以促进结膜淋巴管的增生。3.针刺眼周穴位促进房水中内源性前列腺素表达水平的增加。针刺眼周穴位使房水中内源性前列腺素的表达增加可能为针刺降低青光眼眼压的机制之一。