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胃癌（Gastric Carcinoma）的发病率在中国位于恶性肿瘤的第二位。迄今为止，其病因及发生的分子机制仍不清楚。SOX2作为一个控制胚胎器官发育的转录因子被广泛研究，特别因为能与其它的转录因子协同作用，使体细胞逆分化为IPS细胞而变得非常著名。它除了参与干细胞全能性的维持、胚胎的发育外，在神经系统、胃的器官发育、维持胃上皮细胞的表型和功能等方面也发挥着关键作用。研究表明，SOX2表达下降和丢失可能与胃癌的发生、发展密切相关。但由于使用检测方法、组织来源以及研究目的不同等原因，使得既往有关SOX2在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理参数间关系的研究结果不太一致。因而SOX2在胃癌发生、发展过程中的变化规律、作用机制以及与临床预后之间的关系值得进一步的探索与深究。【目的】SOX2是胃发育特异性转录因子，其异常表达与胃癌的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨SOX2在胃癌发生发展过程中不同病理阶段的表达变化及其临床意义，以及SOX2对胃癌细胞恶性表型的影响及其分子机制。【方法】1.用免疫组化方法检测32例正常胃粘膜，162例慢性浅表性胃炎，122例慢性萎缩性胃炎（或伴肠化/低级别上皮内瘤变），378例胃腺癌，61例胃癌转移灶中SOX2蛋白的表达水平；用WB、qRT-PCR检测从西京消化病医院病理科获得的10例胃癌及癌旁组织新鲜冰冻手术切除标本中SOX2的表达；分析SOX2在胃癌进程各病理阶段组织中的表达，并总结其与胃癌临床病理参数的关系；2.构建SOX2过表达的慢病毒表达载体及其阴性对照载体，使SOX2过表达，感染MKN28胃癌细胞。通过WST-1，裸鼠成瘤实验及Ki67免疫组化染色分别检测SOX2在体内与体外对胃癌细胞生长增殖的影响；3.通过流式细胞术及组织细胞凋亡小体染色检测细胞周期和凋亡的变化；4.通过Transwell迁移、侵袭实验以及裸鼠尾静脉注射内脏转移实验分别在体外和体内研究SOX2对胃癌细胞侵袭转移能力的影响；5.通过ChIP-GLS和表达谱芯片技术筛选SOX2可能作用的靶基因，并用生物信息学分析锁定SOX2作用的靶基因，后进一步用ChIP-PCR、EMSA、荧光素酶报告基因实验等技术进行验证；6.在SOX2高表达的胃癌细胞系中采用预测靶基因敲除技术建立功能缺失模型验证预测的靶基因是否可拮抗SOX2高表达后产生的恶性生物学行为；7.用WB法检测胃癌细胞中SOX2高表达前后相应预测靶基因表达水平的变化，并用免疫组化方法检测这种表达变化关系对胃癌临床预后判断的重要意义。【结果】1.SOX2的表达水平与胃癌发生进程中临床病理参数的分析结果提示，SOX2在正常胃粘膜、肠化、不典型增生、胃癌以及转移灶中表达逐渐降低。SOX2的表达降低与胃癌的分化程度、TNM分期及患者预后密切相关，并可作胃癌患者预后的独立预测指标。2.与对照细胞相比，在胃癌细胞中高表达SOX2后，WST-1、裸鼠成瘤实验及Ki67免疫组化染色结果表明胃癌细胞生长减慢；流式细胞术及组织细胞凋亡小体染色显示细胞凋亡增加；Transwell迁移、侵袭实验以及裸鼠尾静脉注射内脏转移实验均提示胃癌细胞的侵袭和转移能力减弱；但细胞周期无明显变化。3. ChIP-GLS技术发现，胃癌细胞中有718个蛋白质编码基因的启动子能与SOX2结合；表达谱芯片结果显示，SOX2过表达后细胞差异表达的基因有320个。取两者的交集，共有11个基因，其中2个表达上调，9个表达下调。生物信息学分析表明，PTEN作为表达上调的基因可能是SOX2直接调控的靶基因。4. ChIP-PCR、EMSA、荧光素酶报告基因实验以及一系列功能学实验技术证实，SOX2通过上调PTEN， PTEN使Rb去磷酸化来抑制胃癌细胞生长增殖，阻止胃癌细胞凋亡，并削弱其侵袭迁移能力，而对细胞周期并未产生影响。5.用免疫组化检测SOX2、PTEN、Rb在203例癌/癌旁配对组织中表达，结果发现SOX2与PTEN的表达正相关，与pRb的表达负相关。SOX2与PTEN、Rb联合在判断胃癌预后中有重要临床意义，根据SOX2、PTEN的表达情况，将胃癌患者分为SOX2（+）PTEN（+），SOX2（+）PTEN（-），SOX2（-）PTEN（+），SOX2（-）PTEN（-）四组，结果提示SOX2、PTEN表达同时降低，Rb表达升高的患者其预后更差。【结论】1. SOX2在胃癌前病变中已发生显著的表达降低，SOX2表达降低是胃癌发生过程中的早期事件。SOX2的表达变化在判断胃癌患者预后中有潜在的临床价值。2与癌旁组织相比，胃癌中SOX2表达下调的患者临床预后较差；SOX2、PTEN表达同时降低，Rb表达升高的患者预后更差。3.过表达SOX2可通过上调PTEN，使Rb去磷酸化从而抑制胃癌细胞生长并阻止其远处转移。