【摘 要】
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研究背景:结直肠癌是严重危害人类健康的一种恶性肿瘤,其发病机制仍不明确。LncRNA是近年来的研究热点,参与多种类型的疾病进程,在肿瘤的致病中发挥重要作用。目前LncRNA在结直肠癌中的表达及意义的研究仍十分有限,因此进一步研究结直肠癌中LncRNA的表达差异及在肿瘤发生发展中的作用具有重要的意义。研究方法:本研究使用定量PCR的方法检测了 60例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织中RP11-462C
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研究背景:结直肠癌是严重危害人类健康的一种恶性肿瘤,其发病机制仍不明确。LncRNA是近年来的研究热点,参与多种类型的疾病进程,在肿瘤的致病中发挥重要作用。目前LncRNA在结直肠癌中的表达及意义的研究仍十分有限,因此进一步研究结直肠癌中LncRNA的表达差异及在肿瘤发生发展中的作用具有重要的意义。研究方法:本研究使用定量PCR的方法检测了 60例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织中RP11-462C24.1的表达水平并分析与临床病例信息的相关性。选择结直肠癌细胞系SW480及HT-29进行进一步功能学实验。细胞转染RP11-462C24.1过表达质粒及siRNA后,CCK8法检测细胞的增殖情况,流式细胞技术检测细胞的凋亡情况,Transwell迁移实验检测细胞的迁移能力。SW480及HT-29细胞转染RP11-462C24.1过表达质粒及siRNA后,Western Blot检测RPL34,HSP70及PI3K/AKT信号通路相关蛋白。在干扰RP11-462C24.1的细胞中加入AKT抑制剂MK-2206进行功能回复实验。在RP11-462C24.1过表达的细胞中加入过表达HSP70进行功能回复实验。转染RP11-462C24.1过表达质粒至SW480细胞,注射到裸鼠两侧腹股沟皮下构建裸鼠成瘤模型,评估RP11-462C24.1在体内实验中对肿瘤生长的影响。研究结果:本研究检测了 60例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织中RP11-462C24.1的表达水平,结果表明癌组织中RP11-462C24.1的表达显著低于癌旁组织,并且RP11-462C24.1的表达与患者的TNM分期及是否转移具有相关性,同时在结直肠癌细胞系SW480及HT-29中也验证了 RP11-462C24.1表达下降。为进一步研究RP11-462C24.1在结直肠癌中的作用,本研究检测了RP11-462C24.1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响,通过过表达及干扰实验,研究结果表明RP11-462C24.1可抑制结直肠癌细胞的增殖,并促进其凋亡,并证明RP11-462C24.1可抑制结直肠癌细胞的迁移。进一步对信号通路的研究表明RP11-462C24.1通过调节RPL34及HSP70/PI3K/AKT信号通路影响结直肠癌细胞的增殖及凋亡,并通过功能回复实验加以验证。最后,我们在裸鼠成瘤的体内实验进一步证明RP11-462C24.1可显著抑制肿瘤的生长。本研究将有利于进一步了解结直肠癌的致病机制,并为寻找新的结直肠癌治疗靶点及治疗方法提供理论及实验依据。研究结论:RP11-462C24.1在结直肠癌癌组织中表达下降,RP11-462C24.1可抑制结直肠癌细胞的增殖,促进癌细胞的凋亡,抑制癌细胞的迁移能力,并通过RPL34及HSP70/PI3K/AKT信号通路影响结直肠癌细胞的增殖及凋亡,体内外实验证明RP11-462C24.1可抑制结直肠癌细胞的生长,在结直肠癌中发挥抑癌作用。
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