目的:免疫组织化学染色是肿瘤诊断中常见的病理检测方法之一,是肿瘤诊断的金标准。本课题研究开发一种新型全自动免疫组化染色仪,实现在高温高压条件下进行抗原修复,并在较小的空间中实现高通量染色。方法:借鉴高压锅的结构与原理,构建由顶盖、主体和密封圈组成的染色模块,通过电机施加外部压力密封修复模块,使内部的液体能在密封条件下达到更高的沸点。通过把组织片竖直堆叠放置提高仪器内部的空间利用率。将加样系统和染色模块设计成适配组织片竖直堆叠放置的模式,并且根据染色模块的特点,改变了染色的步骤。并且根据过程和抗原抗体结合等环境条件设计了控制系统。对搭建完成的高通量高压修复免疫组化染色仪进行测试和优化并与市售常压修复染色仪的染色结果进行对比。结果:染色仪构建:1.成功搭建了将组织片竖直方向堆叠放置的高压热修复染色模块,可达到内外压差0.1 MPa、内部温度115℃的抗原修复条件,实际测试最大容忍压差0.13MPa,设计的染色模块可将单模块通量提高到20片,搭建的高压免疫组化染色仪的理论整体通量能提高至60或80片,并能有效利用内部空间;2.成功搭建了染色仪的加样模块,将其设计成圆盘状以提高加样效率;3.根据抗原抗体反应、酶显色反应的要求设计了染色仪的控制系统,提高了染色仪的实际应用中的应用适配能力和用户体验。染色仪的测试和优化:1.测试了新型染色模块的可行性和染色效果;2.与市售常压染色仪对比,所设计的新型高通量高压染色仪的常压热修复染色效果等同于常压染色仪,测试对修复温度敏感的一抗,所设计的新型高通量高压染色仪的高压热修复的染色效果明显优于市售仪器染色效果;3.将抗原修复液在外水箱预加热后再加入染色模块中,极大降低了修复步骤加热的耗时。结论:本研究设计和搭建了高通量的高压抗原修复的免疫组化染色仪,弥补了目前免疫组化自动化染色仪器无法采用高压修复的缺陷,提高了全自动免疫组化染色仪的染色效果,为病理医生的诊断提供更可靠的依据。