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目的NR2B/CaMKIIα/CREB 信号通路在外界感受性信息向中枢传递过程中起重要作用,本研究观察布比卡因蛛网膜下腔阻滞对大鼠脊髓NR2B/CaMKIIα/CREB信号通路的影响,探讨椎管内麻醉产生镇静作用的分子机制。 方法 采用热甩尾实验检测大鼠布比卡因蛛网膜下腔注射的时效:建立大鼠蛛网膜下腔阻滞模型,蛛网膜下腔注射0.5%布比卡因20μl,间隔5min 检测一次大鼠甩尾时间,直到给药后65min;采用Western blot、q-PCR和IHC检测大鼠脊髓组织中NR2B、CaMKIIα、p-CaMKIIα、CREB、p-CREB蛋白表达、NR2B mRNA、CaMKIIαmRNA、CREB mRNA含量和NR2B、p-CaMKIIα、p-CREB平均累计光密度表达以明确蛛网膜下腔阻滞产生的镇静作用与NR2B/CaMKIIα/CREB信号通路的关系:蛛网膜下腔成功置管的36 只大鼠随机分为生理盐水组和布比卡因组。蛛网膜下腔注射生理盐水或布比卡因20μl,15min后颈椎脱臼处死大鼠,取脊髓腰膨大组织分别行Western blot、q-PCR和IHC 检测并分析数据。 结果 布比卡因蛛网膜下腔注射后立即起效,5min内达到最大效应,持续30min后衰减,60min后达到给药前水平;蛛网膜下腔阻滞的镇静作用与NR2B/CaMKIIα/CREB信号通路的关系:与生理盐水组相比,布比卡因组降低NR2B、p-CaMKIIα和p-CREB蛋白在大鼠脊髓腰膨大组织中的表达(P<0.01),同时降低了脊髓组织中NR2B mRNA (P<0.001)、CaMKIIαmRNA(P<0.01)和CREB mRNA(P<0.001)的含量。但脊髓组织中总的CaMKIIα和CREB蛋白含量在两组之间表达无显著性差异(P>0.05)。 结论 椎管内麻醉可能通过抑制NR2B/CaMKIIα/CREB信号通路,减少麻醉平面以下感觉和运动信息向大脑中枢的传递,从而降低大脑的觉醒状态,减少镇静药物使用剂量。