X射线辐射对小鼠肾组织结构及相关物质表达的影响

来源 :西北师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cuthberthirsch
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目的用不同剂量的X射线辐射小鼠后,观察小鼠肾脏组织结构、重量的变化;并检测小鼠血清肌酐、尿素氮及肾组织中乳酸脱氢酶(LDH)、Na+-K+ATP酶含量的变化;以及Caspase-3蛋白和Bax蛋白等凋亡蛋白的表达;探讨不同剂量X射线辐射对小鼠肾脏组织的综合影响,从而分析不同剂量X射线辐射条件下细胞损伤情况并探讨细胞凋亡机制。方法将96只成体小鼠随机分为4组,每组24只,分别用0Gy、1Gy、3Gy和5Gy的X射线连续全身辐射3d,于辐射后5d、10d、15d和20d称量检测各期小鼠的肾脏重量,用生物显微技术观察肾脏组织结构的变化,用比色法检测血清肌酐、尿素氮含量及肾脏组织中乳酸脱氢酶(LDH)、Na+-K+ATP酶酶活性变化,用免疫组化法检测肾脏组织中Caspase-3蛋白和Bax蛋白的表达。结果1)经X射线全身辐射后,小鼠的肾重与对照组相比均有不同程度的增加。其中1Gy组小鼠肾重相比对照组虽然有所增加,但差异不显著(P>0.05);3Gy和5Gy组小鼠肾重和对照组相比肾重增加明显,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。5Gy辐射后5d时肾重较其它组增幅最大,与对照组相比约增加0.11g;1Gy辐射后(5、10、15、20d)肾重增幅最小,与对照组相比均仅增加0.02g。2)经X射线全身辐射后,实验组小鼠血清肌酐含量与对照组相比均有不同程度的升高。其中1Gy组5d和15d时,小鼠血清肌酐含量与对照组相比差异极显著(P<0.01);3Gy组5d、10d和20d时,小鼠血清肌酐含量与对照组相比差异极显著(P<0.01);5Gy组5d和10d时,小鼠血清肌酐含量与对照组相比差异极显著(P<0.01)。1Gy辐射后20d时肌酐增幅最小,与对照组相比仅增加1.5μmol/L;5Gy辐射后10d时肌酐含量较其它组增幅最大,与对照组相比约增加16.11μmol/L。3)经X射线全身辐射后,实验组小鼠血清尿素氮含量与对照组相比均有不同程度的升高。其中1Gy组5d和15d时,小鼠血清尿素氮含量与对照组相比差异极显著(P<0.01);3Gy组5d、10d和20d时,小鼠血清尿素氮含量与对照组相比差异显著(P<0.05);5Gy组10d,小鼠血清尿素氮含量与对照组相比差异显著(P<0.05)。1Gy辐射后20d时尿素氮含量增幅最小,为7.09mmol/L,与对照组相比仅增加0.03mmol/L;1Gy辐射后5d时尿素氮含量增幅最大,为9.00mmol/L,与对照组相比增加1.92mmol/L。4)经X射线辐射后,实验组小鼠乳酸脱氢酶活性与对照组相比均有不同程度的升高。其中1Gy组5d,10d,15d时,小鼠肾脏乳酸脱氢酶活性与对照组相比差异极显著(P<0.01);3Gy组10d,15d,20d时,小鼠与对照组相比差异显著(P<0.05);5Gy组10d,小鼠乳酸脱氢酶活性与对照组相比差异显著(P<0.05)。1Gy辐射后20d时乳酸脱氢酶酶活性增幅最小,为3080μmol/min,与对照组相比仅增加960μmol/min;5Gy辐射后10d时乳酸脱氢酶酶活性增幅最大,为4910μmol/min,与对照组相比增加2730μmol/min。5)经X射线全身辐射后,实验组小鼠肾脏组织中Na+-K+ATP酶活性与对照组相比均有不同程度的降低,其中1Gy组5d和10d时,小鼠肾脏组织中Na+-K+ATP酶活性与对照组相比差异极显著(P<0.01);3Gy组10d、15d和20d时,小鼠肾脏组织中Na+-K+ATP酶的活性与对照组相比差异显著(P<0.05);5Gy组5d和10d,小鼠肾脏组织中Na+-K+ATP酶的活性与对照组相比差异显著(P<0.05)。1Gy辐射后20d时乳酸脱氢酶酶活性降幅最小,为11.28μmolpi/mgprot/hour,与对照组相比仅降低4.13μmolpi/mgprot/hour;5Gy辐射后10d时Na+-K+ATP酶酶活性降幅最大,为15.32μmolpi/mgprot/hour,与对照组相比降低11.08μmolpi/mgprot/hour。6)免疫组织化学结果显示,经X射线全身辐射后,肾小球细胞阳性表达不明显,肾小球血管内皮细胞中未见黄色阳性出现,但小鼠肾小管细胞的细胞浆和细胞膜上呈黄色阳性,且随着辐射剂量和时间的不断增加,阳性表达不断增强,表明Caspase-3的表达相较于对照组而言有明显的增加。7)免疫组织化学结果显示,经X射线全身辐射后,Bax蛋白阳性表达部位主要集中于肾小管的细胞质和细胞膜上且被染成棕黄色或黄色,肾小球血管内皮细胞中未见其表达。表明小鼠经X射线辐射后,肾脏组织中Bax蛋白阳性表达均有不同程度的增强,且辐射程度越大,Bax蛋白阳性表达越强。结论1)X射线辐射肾重量增加现象明显,且与剂量呈正相关。2)X射线辐射影响小鼠肾脏的组织结构。辐射剂量越大,肾组织损伤越严重。3)经X射线辐射后,小鼠血清中肌酐、尿素氮的含量均有不同程度的增加,且增加明显。4)经X射线辐射后,肾脏组织中乳酸脱氢酶含量升高,且与辐射剂量成正比。5)X射线辐射后,肾组织中Na+-K+ATP酶活性降低,与对照组相比差异显著或极显著。6)X射线辐射后,肾组织中凋亡蛋白Bax蛋白、Caspase-3蛋白大量表达。
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