【摘 要】
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目的:本课题拟通过研究Rspo1蛋白在妊娠期糖尿病与正常妊娠孕妇血清及胎盘中的表达差异,并进一步探讨Rspo1蛋白与胰岛素抵抗的关系,从而阐明Rspo1蛋白在妊娠期糖尿病发病机制中的作用。方法:随机选取2020年7月至2021年1月在青岛市市立医院产科规律产检、分娩方式为剖宫产的单胎妊娠孕妇60例,其中妊娠期糖尿病孕妇30例,作为GDM组,同期糖耐量正常的30例孕妇作为对照组。排除妊娠合并内外科疾
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目的:本课题拟通过研究Rspo1蛋白在妊娠期糖尿病与正常妊娠孕妇血清及胎盘中的表达差异,并进一步探讨Rspo1蛋白与胰岛素抵抗的关系,从而阐明Rspo1蛋白在妊娠期糖尿病发病机制中的作用。方法:随机选取2020年7月至2021年1月在青岛市市立医院产科规律产检、分娩方式为剖宫产的单胎妊娠孕妇60例,其中妊娠期糖尿病孕妇30例,作为GDM组,同期糖耐量正常的30例孕妇作为对照组。排除妊娠合并内外科疾病、合并其他内分泌疾病、合并传染病等。（1）分析两组孕妇年龄、体质量指数（BMI）、孕周情况等一般资料差异;（2）检测两组孕妇空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）水平,应用胰岛素稳态模型评估法（HOMA）计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;（3）酶联免疫吸附实验（Elisa）检测两组孕妇血清中Rspo1蛋白的表达差异;（4）实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测两组孕妇胎盘中Rspo1 m RNA的表达差异;（5）免疫组织化学及Western blot分析两组孕妇胎盘中Rspo1蛋白的表达差异;（6）分析GDM孕妇血清中Rspo1表达水平与BMI、FBG、FINS及HOMA-IR的相关性。结果:（1）两组相关指标分析结果显示,GDM组与对照组的FBG水平分别为5.35±0.35mmol/L、4.33±0.22 mmol/L;GDM组与对照组的FINS水平分别为12.33±0.90m U/L、6.49±0.61m U/L;GDM组与对照组的HOMA-IR值分别为2.93±0.25、1.25±0.16。GDM孕妇的FBG、FINS、HOMA-IR水平较正常妊娠孕妇明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。（2）Elisa实验结果显示,GDM组与对照组的Rspo1蛋白表达水平分别为566.88±181.34pg/m L、377.00±166.83pg/m L。GDM组血清Rspo1表达量较对照组明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。（3）RT-PCR结果显示,GDM组Rspo1 m RNA的表达量为1.46±0.61,对照组Rspo1 m RNA的表达量为0.80±0.69。GDM孕妇对比正常妊娠孕妇胎盘中Rspo1m RNA表达明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。（4）免疫组化结果显示,Rspo1蛋白在GDM和正常妊娠孕妇的胎盘组织中均有表达,GDM孕妇胎盘组织中Rspo1蛋白的表达明显高于正常妊娠孕妇,差异有统计学意义（P＜0.01）;Rspo1蛋白主要表达于胎盘滋养细胞的细胞质。（5）Western blot结果显示,Rspo1蛋白在GDM组胎盘组织中的表达水平为0.34±0.08,在对照组胎盘组织中的表达水平为0.21±0.09。GDM孕妇胎盘组织Rspo1蛋白表达水平与正常妊娠孕妇相比升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。（6）通过Pearson相关性分析得到,GDM孕妇血清中Rspo1水平与FINS、HOMA-IR呈现明显正相关性（P＜0.01）。结论:1.GDM孕妇血清及胎盘组织中Rspo1表达量明显高于正常孕妇。2.GDM孕妇血清Rspo1表达水平与胰岛素抵抗指数呈正相关,血清Rspo1表达水平可反应胰岛素抵抗程度。3.Rspo1可能通过调节胰岛素分泌及胰岛素抵抗参与GDM的发病。
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