PMMA骨水泥在不同粘稠状态下抗肿瘤作用的动物实验研究

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目的:研究聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,PMMA)骨水泥在粘稠早中期、粘稠后期的抗肿瘤作用。材料和方法:1.建立椎旁肿瘤模型:CT引导下经皮穿刺将VX2瘤块接种入新西兰大白兔的椎旁软组织内,建立椎旁肿瘤模型。接种半月后行PET-CT检查模型建立情况,并测定建模成功椎旁肿瘤的SUV最大值(SUVmax)及SUV平均值(SUVmean)。2.实验分组和治疗方法:选取30只成功建立椎旁肿瘤模型的实验兔,随机分为A、B、C组,每组10只。A组为模拟PVP时骨水泥的注射粘稠状态组,将1.0mlPMMA骨水泥于粘稠早中期注射入肿瘤内;B组为模拟PKP时骨水泥的注射粘稠状态组,将1.0mlPMMA骨水泥于粘稠后期注射入肿瘤内;C组为假手术对照组,将1.0ml生理盐水注射入肿瘤内。术后第1天、第7天各选取5只实验动物,按术前检查方法再次接受PET-CT检查,测定肿瘤SUVmax、SUVmean值。然后处死实验动物,取椎旁肿瘤标本行HE染色、TUNEL细胞凋亡检测。3.观察指标:①SUV值变化:测定治疗前后各实验组、各时间点椎旁肿瘤的SUVmax、SUVmean值;②HE染色结果:光镜下观察肿瘤内注射骨水泥后,在骨水泥周边以及远离骨水泥处的肿瘤细胞坏死情况;③TUNEL细胞凋亡检测结果:观察肿瘤细胞凋亡并计算凋亡指数。4.统计学处理:采用可重复检验的方差分析比较治疗前后肿瘤的SUVmax、SUVmean值有无差异;采用析因分析比较治疗后各组的肿瘤,在不同时间点间的SUVmax、SUVmean值有无差异;采用析因分析比较治疗后不同实验组间、不同时间点间、骨水泥周边及远离骨水泥处的肿瘤细胞的凋亡指数有无差异。结果:1.PET-CT检测:A组和B组肿瘤SUV值治疗前与治疗后各时间点皆存在统计学差异(P<0.05),治疗后SUV值明显降低,以治疗后第1天降低最明显,生理盐水组术后肿瘤的SUV值逐步升高;治疗后各时间点肿瘤SUV值A组及B组与C组之间皆有统计学差异(P<0.05);治疗后各时间点肿瘤SUV值A组与B组之间无统计学差异(P>0.05)。2.HE染色结果显示:治疗后第1天A组、B组骨水泥周边区域肿瘤细胞明显坏死,在坏死的肿瘤细胞中可见少许残存的肿瘤细胞,尤以远离骨水泥的肿瘤区域内较多见,治疗后第7天骨水泥周边残存肿瘤细胞较第1天有明显增多,远离骨水泥处肿瘤细胞生长活跃。生理盐水组各时间点肿瘤细胞坏死不明显。3.TUNEL细胞凋亡检测结果显示:凋亡指数在不同材料组间、不同部位间以及不同时间点间比较都具有统计学差异(P<0.05)。术后1天A组、B组骨水泥周边肿瘤细胞凋亡明显,远离骨水泥的肿瘤细胞亦可见部分调亡,但两组之间差异不显著。治疗后第7天肿瘤细胞凋亡明显减少。对照组肿瘤内见少量小片状细胞凋亡。结论:PMMA骨水泥可导致在短期内肿瘤细胞明显坏死,并能显著诱导肿瘤细胞凋亡,且对其邻近肿瘤细胞的抗肿瘤作用强于远离骨水泥处的肿瘤细胞。随着治疗后时间的延长此种抗肿瘤作用会有所下降。PMMA骨水泥短期内抗肿瘤作用在粘稠早中期和粘稠后期无差异。
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