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目的:胃癌亦称为胃腺癌,是全球第五大常见癌症和第三大癌症死亡原因,其在我国的发病率及死亡率位居第二。虽然诊断方法和外科手术方面已经取得了许多进展,但近年来胃癌患者在大多数国家,5年总存活率不到30%。研究发现环状RNA(circRNA)与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关。目前有研究发现circ-DNMT1在乳腺癌组织及细胞中处于高表达水平,可以促进乳腺癌的生长和转移。但是circ-DNMT1在胃癌中生物学功能及其作用机制尚未明确,有待研究。方法:(1)circ-DNMT1在胃癌中的表达水平:前期通过预实验摸索实验条件,验证引物,然后检测在少量胃癌患者肿瘤组织中的circ-DNMT1表达水平,后期扩大样本量。检测circ-DNMT1在胃癌肿瘤组织及胃癌细胞中的表达水平,使用qRT-PCR(实时荧光定量PCR)的方法。然后进行数据整理同时统计样本的临床病理参数,分析circ-DNMT1的表达水平与病理资料之间是否有关联,也探讨circ-DNMT1是否可以成为胃癌诊断的生物标志物。(2)circ-DNMT1在胃癌细胞的中的增殖作用:选取合适的胃癌细胞,进行生长曲线测定和克隆形成体外实验和裸鼠皮下荷瘤体内实验,研究circ-DNMT1对胃癌细胞增殖作用。再通过流式细胞,qRT-PCR和western blot实验来验证circ-DNMT1是否抑制胞凋亡而促进胃癌细胞的增殖。(3)circ-DNMT1在胃癌细胞中的迁移侵袭作用及EMT的影响:首先采用体外Transwell迁移和Transwell侵袭实验,研究circ-DNMT1是否影响胃癌细胞转移能力。其次qRT-PCR和western blot检测与上皮-间充质转化(EMT)相关基因及蛋白表达水平,推测circ-DNMT1是否通过EMT途径来对胃癌转移产生影响。结果:(1)circ-DNMT1在胃癌组织与正常组织对照,表达升高。Circ-DNMT1在胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、HGC-27、BGC-823和AGS中的含量均比正常胃上皮细胞(GES-1)高。通过与临床病理资料中的的相关参数分析提示,circ-DNMT1的表达水平与淋巴结转移有关。(2)敲减circ-DNMT1后可抑制胃癌细胞增殖,对细胞凋亡影响无统计学意义,敲减circ-DNMT1后可以抑制胃癌细胞在裸鼠体内生长。(3)敲减circ-DNMT1后与对照组结果相比,表明敲减circ-DNMT1可抑制细胞的迁移和转移,qRT-PCR和western blot检测提示敲减circ-DNMT1可影响EMT相关基因和蛋白变化,故推测circ-DNMT1可能是通过EMT途径促进胃癌细胞的转移。结论:Circ-DNMT1在胃癌组织和细胞中高表达,不仅促进胃癌细胞增殖,还促进胃癌细胞的迁移和侵袭,同时可能通过EMT从而促进胃癌的发生发展,有望成为胃癌诊断和治疗的潜在价值。