H.pylori对人牙周膜成纤维细胞细胞增殖和细胞周期影响的研究

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[目的]通过体外培养人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)和幽门螺杆菌(H.pylori),建立体外H.pylori感染PDLFs的模型,观察H.pylori作用于PDLFs后,其细胞增殖和细胞周期的变化,从而探讨H.pylori与PDLFs的关系,为H.pylori与牙周病的相关性提供实验室依据。[方法]1.体外培养PDLFs,将细胞浓度调整为2×105/ml。2.利用布氏改良卵黄琼脂选择培养技术,培养H.pylori,并调整H.pylori浓度为1×108cfu/ml、2×107cfu/ml、4×106cfu/ml、8×105cfu/ml、0cfu/ml。3.将各浓度组H.pylori分别与PDLFs细胞共培养,建立H.pylori感染PDLFs的体外模型,采用四甲基偶氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法和流式细胞术(Flow cytometry,FCM),观察不同浓度的H.pylori对PDLFs的细胞生长增殖和细胞周期的影响情况。[结果]不同浓度H.pylori作用于PDLFs 6h、12h、24h后,与对照组相比,OD值均减小(p<0.05),说明不同浓度的H.pylori均能抑制PDLFs的生长。并且作用相同时间,随着H.pylori浓度的增加,OD值逐渐减小;而相同浓度时,时间越长,OD值也逐渐减小。H.pylori作用于PDLFs 12h后,随H.pylori浓度的增加,细胞周期中GoG1期比例逐渐增高,而S期和G2M期的比例则呈下降趋势(P<0.05)。[结论]H.pylori对PDLFs有增殖抑制作用和细胞周期阻遏作用,H.pylori与牙周病密切相关。
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