乙酰甲喹(mequindox),又名痢菌净,化学名为3-甲基-2-乙酰基-喹噁啉-N1,N4-二氧化物。是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所最早合成的一类新兽药。兽医临床上广泛用于仔猪黄、白痢、猪痢疾及禽大肠杆菌病等疾病的防治。本文主要研究内容包括:乙酰甲喹在鸡体内代谢物结构鉴定及其在鸡体外代谢的研究;乙酰甲喹及其主要代谢物在鸡体内的药动学特征;乙酰甲喹主要代谢物在鸡各组织的分布及残留消除;乙酰甲喹主要代谢物在鸡粪便中的排泄。　　 1 乙酰甲喹在鸡体内代谢物结构鉴定及其在鸡组织匀浆中的体外代谢　　 建立了乙酰甲喹在鸡血浆及组织匀浆液中的检测方法,利用高效液相色谱分离、电喷雾-线性离子阱质谱法(LC-ESI/LTQ)、电喷雾-离子阱/飞行时间串联质谱法(LC-ESI/IT-TOF)鉴定鸡血浆中乙酰甲喹代谢物的结构。分别采用Hypersil Gold、Symmetry ShieldTM色谱柱,以含有0.01％甲酸/水溶液(A)和甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI)正离子模式进行检测。鸡内服给药乙酰甲喹(20 mg/kg体重)后,翅下静脉采血,待分析血浆用体积比3∶2的乙酸乙酯/乙腈混合液提取,吹干,残渣用30％甲醇/水溶液复溶,上机检测;用Shimadzus Composition分子预测软件推测分子离子及其子离子质量,Xcalibur 2.0.7软件分析线性离子阱质谱仪测得的质谱图。根据分子量以及多级质谱的碎片离子数据,结合体内代谢反应规律,对其代谢物进行结构鉴定,鉴定了11种主要代谢物。乙酰甲喹体外代谢试验采用鸡心、肝、脾、肺、肾、小肠及其内容物匀浆液37℃条件下与乙酰甲喹共同孵育,6 h后用冰冷的2％高氯酸终止反应,样品处理后采用HPLC法检测,对照组为不添加组织的培养液与乙酰甲喹。结果表明,乙酰甲喹在鸡各组织器官均可被代谢。　　 2 乙酰甲喹及其主要代谢物在鸡体内的药动学特征　　 本文研究了乙酰甲喹及其两种主要代谢物M1、M2在鸡体内的药动学过程。30只8周龄健康科宝-500白羽鸡随机分为3组,分别单剂量静注(10 mg/kg体重)、肌注(10 mg/kg体重)与内服(20 mg/kg体重)给药乙酰甲喹,采用HPLC法测定乙酰甲喹及其代谢物血药浓度。结果表明,鸡静注、肌注、内服给乙酰甲喹后,药-时曲线下面积(AUC0-∞)分别为:0.73、0.72、0.22 μg·h/mL(乙酰甲喹);36.21、39.78、86.23 μg·h/mL(M1);8.71、10.36、22.83 μg·h/mL(M2),消除半衰期分别为:0.16、0.19、0.54 h(乙酰甲喹);6.70、5.27、5.84 h(M1)及3.47、5.16、6.35 h(M2)。肌注与内服给药后乙酰甲喹生物利用度(F)分别为:98.63％与15.07％。静注给药后乙酰甲喹稳态分布容积(Vss)为1.21 L/kg,体清除率(ClB)为11.70 L/h/kg。肌注与内服给药后,峰浓度分别为(Cmax)3.04,0.31 μg/mL(乙酰甲喹);3.81、5.98 μg/mL(M1);0.97、1.78 μg/mL(M2),相应的达峰时间(tmax)分别为:0.08、0.43 h(乙酰甲喹);0.66、6.67 h(M1);1.83、11.14 h(M2)。结果表明,乙酰甲喹在鸡体内代谢快,代谢产物多,与原药相比代谢物具有更高的峰浓度与药时曲线下面积。　　 3 乙酰甲喹代谢物在鸡组织中的分布及残留消除　　 取60只6周龄健康科宝-500白羽鸡随机分为给药组及空白对照组,给药组每12h给药一次,给药剂量为30 mg/kg体重,连续给药3天,于最后一次给药后4、6、8、12、16、24、36、48、72 h时间点杀鸡,每次6只,取其心、肝、脾、肺、肾、肌肉及皮脂等组织,匀浆。待分析组织用2％高氯酸沉淀蛋白,体积比1:1的二氯甲烷/正己烷混合液提取,吹干,残渣用30％甲醇/水溶液复溶,HPLC法检测。结果表明,各组织脏器均有多种代谢物分布,在主要代谢器官肝脏及肾脏,代谢物M2浓度明显高于代谢物M1,脾脏与肺脏中代谢物M2浓度低于代谢物M1,在心脏、肌肉及皮脂中两者浓度相差不大,给药后72 h几乎检测不到代谢物。　　 4 乙酰甲喹代谢物M1、M2在鸡粪便中的排泄　　 33只7周龄健康科宝-500白羽鸡随机分为3组,静注与内服给药组分别15只,每个代谢笼饲养3只,空白组3只。鸡单剂量静注及内服乙酰甲喹30 mg/kg体重后,于不同时间间隔收集其所有粪便,称重,取其中2 g用体积比1∶1的二氯甲烷/乙腈混合液提取,吹干,残渣用30％甲醇/水溶液复溶,HPLC法检测。结果表明,不同给药途径其代谢物种类基本一致,其中粪便中代谢物M1、M2在所占给药乙酰甲喹总量的比例分别为3.20％及4.58％。