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本研究为寻找治疗心血管疾病以及糖尿病药物的先导化合物,利用哺乳动物单杂交技术与高通量筛选技术在细胞水平上,建立了以FXR为靶点的FXR激动剂的高通量筛选模型,为寻找治疗血脂异常疾病药物的先导化合物开辟了道路。从肝细胞的总RNA中,利用RT-PCR扩增FXR-LBD基因,将此DNA序列连接到pBind载体上构建了融合表达载体pBind-FXR;合成含5个拷贝的GAL4 DNA结合序列(GAL4RE)并接到pGl3 promoter载体上构建了报告载体pGl3-GAL4。通过表达质粒和报告质粒