自拟方“马归液”对膀胱癌T24细胞的干预作用及其机制研究

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhiyuanfengxiang
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目的:探究马归液对膀胱癌T24细胞的干预作用及其抑制趋化因子17/趋化因子受体4介导的人膀胱癌T24细胞迁移与迁袭作用?方法:1.通过CCK8法、生物倒置光学显微镜观察以及流式细胞仪检测技术,观察分析马归液对膀胱癌T24细胞的抑制作用,以及对细胞形态和细胞周期的影响。2.通过Western Blot、q RT-PCR以及细胞免疫荧光技术检测CCR4在人膀胱癌T24细胞表达及中药马归液对CCR4的干预作用。3.通过Transwell实验和细胞划痕实验检测马归液抑制CCL17对膀胱癌细胞的侵袭迁移能力作用。结果:1.中药马归液对膀胱癌T24细胞有明显的抑杀作用,随药物浓度的增加和培养时间的延长,T24细胞活率明显减少,各组坏死脱落细胞数量也随之提高,各药物浓度间差别有统计学意义(P<0.05)。2.流式细胞仪检测分析不同浓度马归液作用后的T24细胞周期百分率差别有统计学意义(P<0.05),药物作用后细胞主要滞留在G1期。3.趋化因子受体CCR4在膀胱癌T24细胞中明显高表达;中药马归液能抑制CCR4在T24细胞上的表达,差别有统计学意义(P<0.05)。4.趋化因子CCL17能增强膀胱癌T24细胞侵袭迁移能力,同时促进CCR4的表达;马归液能抑制CCL17介导的膀胱癌T24细胞侵袭迁移能力。结论:1.马归液能直接抑杀膀胱癌T24细胞,显示有剂量效应-时间效应。马归液在G1/S期阻止T24细胞周期,抑制细胞增殖。2.马归液能抑制CCL17-CCR4介导人膀胱癌T24细胞迁移和侵袭作用。其机理待进一步探讨
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