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目的:观察RPL15在胰腺导管腺癌组织中异常表达的临床意义及与患者预后的关系;研究RPL15对胰腺导管腺癌细胞生物学功能的影响;初步探索RPL15在胰腺导管腺癌中发挥生物学功能的分子机制及途径,以期为胰腺导管腺癌的分子诊断和临床治疗寻找新的靶点和思路,并提供相应的理论和实验依据。方法:利用公共基因芯片数据,筛选并鉴定出与胰腺导管腺癌预后相关且异常表达的蛋白编码基因RPL15,并在本课题组自己的样本中通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR),蛋白免疫印迹实验(Western Blot)及免疫组化(immunohistochemistry,IHC)对RPL15进行验证,分析其与胰腺导管腺癌患者临床病理学特征及预后的关系;构建RPL15 si RNA干扰和质粒过表达胰腺导管腺癌细胞株,并通过细胞增殖、侵袭等体外细胞功能实验及裸鼠皮下成瘤转移瘤实验研究RPL15对于胰腺导管腺癌细胞生物学功能的影响;通过基因集富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)方法分析RPL15表达与基因特征(gene signatures)的关系;通过q RT-PCR,Western bolt检测RPL15对上皮间质转化(EMT)的调控作用;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测RPL15过表达后的细胞上清液MMP-2,MMP-9。结果:不论是在公共基因芯片数据中,还是在本课题组自己的样本中,RPL15在胰腺导管腺癌中显著低表达;胰腺导管腺癌组织中RPL15的表达水平与患者TNM分期、肿瘤浸润程度、脉管侵犯、组织分化程度密切相关;Kaplan-Meier生存分析显示RPL15表达与胰腺导管腺癌患者预后密切相关,RPL15高表达患者总生存率显著高于低表达患者;多因素分析显示RPL15表达是影响胰腺导管腺癌患者预后的独立预后因素(HR:0.461,P=0.000);选取RPL15表达量最高的PANC-1细胞进行RNA干扰实验,选取表达量较低的SW1990细胞进行过表达实验,CCK-8实验显示:过表达RPL15对SW1990细胞的增殖能力无影响;Transwell迁移实验结果显示:干扰RPL15后的PANC-1细胞侵袭能力显著增强,过表达RPL15的SW1990细胞侵袭能力显著降低;裸鼠皮下成瘤转移瘤实验结果显示:RPL15高表达组中发生肺转移的小鼠所占比例显著低于对照腺病毒组和PBS组;GSEA分析提示RPL15低表达组与EMT关系密切;检测过表达RPL15后的SW1990,As PC-1胰腺导管腺癌细胞中EMT标记物m RNA和蛋白的表达,结果显示:上皮标记物CDH1(E-cadherin),ZO-1显著升高,间质标记物CDH2(N-cadherin),FN-1显著降低,并且具有剂量效应;检测过表达RPL15后的SW1990细胞上清液中的MMP-2,MMP-9,结果显示:MMP-2,MMP-9较对照组显著降低。结论:RPL15在胰腺导管腺癌中异常低表达;RPL15在胰腺导管腺癌组织中的表达水平与TNM分期、肿瘤浸润程度、脉管侵犯、组织分化程度及预后密切相关,RPL15高表达的胰腺导管腺癌患者病程相对较早、预后更好。RPL15可作为独立因子来预测胰腺导管腺癌患者的预后;RPL15在胰腺导管腺癌发挥抑癌基因的作用。RPL15可以抑制胰腺导管腺癌细胞侵袭和转移,但对于细胞增殖能力无影响;RPL15通过上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)途径抑制了胰腺导管腺癌的侵袭和转移。