【摘 要】
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目的 1) 研究自体骨复合纤维蛋白凝胶负载原代单层培养的自体软骨细胞修复关节骨软骨缺损的可行性,探索一种关节骨软骨缺损的修复方法。2) 初步探讨自体松质骨复合纤维蛋白凝
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目的 1) 研究自体骨复合纤维蛋白凝胶负载原代单层培养的自体软骨细胞修复关节骨软骨缺损的可行性,探索一种关节骨软骨缺损的修复方法。2) 初步探讨自体松质骨复合纤维蛋白凝胶作为骨软骨组织工程化支架材料的可行性。 方法 取27只4周龄健康新西兰大白兔,体重为460g～520g,平均约500g,雌雄不限,随机分A(骨复合FG+软骨细胞+骨膜移植组)、B(骨复合FG+骨膜移植组)、C(FG+骨膜移植组)三组,每组各9只。分别取A组9只兔子的双侧膝关节股骨滑车及部分髁部的软骨,在体外进行分离和消化,未完全消化的软骨组织加软骨细胞在培养瓶内一同培养2周后配制成浓度为1.6×10~8/ml的软骨细胞悬液,等分装于两个EP管中。在A组的每只兔子的一侧膝关节股骨滑车部人为造成3mm×4mm的骨软骨缺损,骨刀切除软骨下骨到髓腔渗血为止(厚约4mm),压迫后FG止血;取髂骨骨块,并尽可能保留松质骨,取下的骨块用PBS反复清洗,以除去血细胞,将松质骨填充在骨缺损处,松质骨面朝向关节腔,高度与周边软骨下骨齐平,把骨膜片生发层朝向关节腔,用无创伤缝合线缝合在周边的软骨或滑膜组织上;向EP管中加入1/2悬液体积的FG主体胶溶液并混匀,再与主体胶等体积的催化剂溶液一同注射入骨膜与骨块密闭的腔隙中;同理处理另一侧膝关节。B组处理与A组相比只是不加入软骨细胞;C组造成骨软骨缺损,FG覆盖创面后单纯用骨膜修复缺损。分别在4、8、12周每组各取3只兔子6个关节进行大体、HE、Safranin-O、甲苯胺篮染色、Ⅱ型胶原免疫组化进行组织形态学以及透射电子显微镜超微结构观察
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