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[背景]放射性口腔黏膜炎(radiation-induced oral mucositis,ROM)是指各种放射引起的急慢性口腔黏膜损伤。它大多数是骨髓移植前大剂量照射或头颈部癌症患者放疗时发生的共同的副作用。严重的口腔黏膜炎会影响原发病的治疗,显著降低患者的生活质量,因此积极治疗口腔黏膜炎是肿瘤辅助治疗的重要组成部分。S1PR1为G蛋白耦联受体,在适应性免疫细胞、天然免疫细胞以及血管内皮细胞均有表达。最新研究显示,S1PR1调节剂可能通过抑制天然免疫细胞或适应性免疫细胞S1PR1激活,阻止放射引起的进行性炎症免疫反应,或调节内皮细胞S1PR1激活状态,减轻放射引起的细胞因子风暴,最终改善了放射损伤后器官微环境。因此,S1PR1很可能通过上述某一环节直接参与了机体放射损伤后组织器官功能重建调节。本研究拟建立放射性口腔黏膜炎小鼠动物模型,观察S1PR1激动剂对放射性口腔黏膜炎的防护作用,进而为ROM发病机制的阐述、药物研发和临床救治提供理论依据。[目的]研究S1P1受体激动剂对放射性口腔黏膜炎的防护作用,并对其发生机制和靶点进行初步探讨。[方法]1.建立ROM小鼠模型;观察不同照射剂量(16Gy、17Gy、18Gy)、S1P受体激动剂FTY720照前预防给药(照前48h、36h、24h、12h、3h)、FTY720照后治疗给药(照后2h、6h、12h),FTY720不同给药剂量(2.5mg/kg、5.Omg/kg和 10mg/kg)对放射性口腔黏膜炎舌黏膜的影响,对FTY720进行最佳给药方案的摸索;之后通过对ETY720对照后小鼠30天存活、角化上皮细胞增殖的影响、照后舌黏膜不同时间点的观察,对FTY720防护作用机制进行初步探索;接着我们将FTY720和文献报道的放射性口腔黏膜炎治疗剂进行效应比较。变化的影响。2.在ROM小鼠模型基础上给予S1P1受体专一性激动剂CYM5442和专一性拮抗剂NIBR-0213,通过对照射小鼠30天存活率及体重变化观察,舌黏膜组织学和病理学观察研究其对ROM的防护作用,对S1PR1调节剂防治ROM中的作用靶点进行初步探索。[结果]1.S1P受体激动剂FTY720对ROM小鼠的防护作用研究1.ROM小鼠模型建立成功实验小鼠头颈部接受单次17Gy的X线照射,在照后7天小鼠舌黏膜的病理观察中,相对于正常组,照射组甲苯胺蓝染色后病损区着色阳性,且HE染色后镜下观察上皮结构完全崩解,鳞状上皮坏死脱落形成溃疡,此模式小鼠可称为ROM小鼠。1.2 FTY720对ROM有防护作用及FTY720最佳给药方案通过对实验小鼠进行不同照射剂量下照射、不同时间和不同剂量给药后,发现在17Gy照射下,照前3h、12h、24h三个预防给药时间下,给药剂量在FTY720 10mg/kg时,FTY720给药组舌黏膜保持完整,与正常组比较基本无异,与对照组比较有统计学差异。说明FTY720对ROM小鼠有显著保护作用。1.3 FTY720对ROM防护作用机制初步探索FTY720显著提高ROM小鼠存活率,17Gy照射下,对照组存活率为28.57%,FTY720照前3h、12h、24h给药30天存活率分别为75%、100%、100%,显著提高小鼠存活;18Gy照射下,对照组在照后11天全部死亡,FTY720给药存活率达到62.5%。通过免疫组化Ki-67方法检测,FTY720给药组小鼠每mm舌黏膜角化细胞数为276.9±31.6,明显高于照射对照组33.1±6.1,有统计学意义。通过对ROM小鼠舌黏膜不同时间点的观察,了解ROM和FTY720干预后的黏膜病理变化规律。2.S1PR1调节剂防治放射性口腔黏膜炎的作用机制初步探索S1PR1专一性激动剂CYM5442照前3h、12h和24h给药上皮均保持完整,无明显溃疡发生,且显著提高小鼠存活率至87.5%、100%和100%;S1PR1专一性拮抗剂NIBR-0213给药后小鼠舌黏膜保持完整,无溃疡发生。说明S1PR1可能是防治ROM的主要靶点。[结论]S1PR1调节剂对ROM小鼠具有防护作用,S1PR1可能是预防ROM发生的主要靶点之一。