低温诱导烟草早花相关因子的分析

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本研究对烤烟品种K326进行整株和单叶的低温胁迫处理,检测了烟株不同部位组织器官的蔗糖含量和抗坏血酸氧化还原状态的变化及其相关酶活性,并对烟草开花相关基因的表达水平进行检测分析,以期探寻低温诱导烟草早花的相关调控因子。在实验的验证阶段,通过对芽体外施加蔗糖、抗坏血酸、DHA等,检测芽中开花相关基因的表达情况,从而确定其在诱导开花相关基因表达中的主导作用,研究结果如下:1.低温促使蔗糖向顶端分生组织快速转运。对低温胁迫下烟草植株地上部分各组织器官中与蔗糖合成相关基因的表达水平、酶活性、蔗糖含量、蔗糖运转走向进行了系统研究,并进行组织染色确定淀粉在叶片不同区域的积累分布状况。发现低温处理后,叶片中可溶性糖含量升高,蔗糖磷酸合成酶SPS活性升高,淀粉酶活性降低,淀粉在叶脉处积累增加,叶片中SPSC表达量显著升高,叶脉中蔗糖转运体SUT1基因表达量上升,蔗糖从叶片经由侧脉、叶柄和茎向顶端分生组织的转运增加,单叶处理也显示这种趋势,顶芽中蔗糖含量分别增加了60. 22%和16.55%,这种现象主要由叶片中的SPS活性提高和侧脉中SUT1的表达量增加所致,而并非由淀粉的降解导致。2.低温导致抗坏血酸库趋于氧化态势。低温处理后,叶片中抗坏血酸总量下降,叶柄、茎和芽中AsA变化不大或少量上升,但DHA含量呈梯度上升,其在P,S,AM增幅分别为整株处理:3.09%,25.05%,22.45%,单叶处理:16.15%,5.81%,19.73%,表明低温胁迫促使了芽中DHA含量的提升,AsA含量在芽中变化不大,(AsA+DHA)总量的升高主要由于DHA的升高造成的,芽中抗坏血酸趋于氧化态升高趋势。3.低温诱导成花相关基因表达水平上调。检测开花相关基因表达情况显示低温处理后,芽中SOC1表达量显著增加,单叶处理也会造成相似的表达调控结果。4.探讨了诱导花芽分化相关因子对成花相关基因表达的影响。低温促使了芽中蔗糖与DHA的积累及SOC1基因的调控表达,用蔗糖、抗坏血酸、DHA离体处理K326的芽,检测SOC1基因的表达情况。结果显示:DHA处理显著增强了芽中SOC1基因的表达,而蔗糖与AsA并未明显影响SOC1的表达变化,说明DHA为低温诱导的烟草开花中较为直接的调控因子。
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