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目的:试验构建肉鸡六价铬(Hexavalent chromium,Cr6+)中毒及酵母硒(Yeast selenium,Se Y)治疗模型,通过观察肉鸡脾脏组织病理学变化、检测脾脏脏器指数、氧化损伤指标、血液免疫功能指标、细胞因子和NF-κB信号通路中基因m RNA及蛋白的相对表达量。研究饲料中添加Se Y对Cr6+中毒肉鸡脾脏炎症反应的缓解作用,为Se Y作为饲料添加剂在提高动物免疫性能上的应用提供有力支持。方法:将100只1日龄AA肉鸡随机平均分成4组(n=25),对照(C)组,酵母硒(Se)组,酵母硒/六价铬(Se/Cr6+)组和六价铬(Cr6+)组,试验前进行一周的适应性饲喂,试验期为6周。试验结束后,各组肉鸡经过12 h禁食处理,称量记录每只肉鸡的体重,处死肉鸡后,分离出脾脏组织并称量记录重量。采用生化试剂盒及酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测肉鸡脾脏组织中氧化应激指标及免疫功能指标。采用苏木精—伊红染色法(Hematoxylin-eosin,HE)制作切片观察脾脏组织病理学损伤。使用实时荧光定量PCR(Fluorescence quantitative polymerase chain reaction,q PCR)技术检测肉鸡脾脏组织细胞因子和NF-κB信号通路相关基因m RNA相对表达量。使用蛋白质印迹实验(Western Blotting,WB)检测脾脏组织细胞因子和NF-κB信号通路中蛋白的相对表达量。结果:1.脾脏脏器指数结果显示:与C组比较,Se/Cr6+组和Cr6+组的脾脏脏器指数显著下降(p<0.05)。与Cr6+组比较,Se/Cr6+组的脾脏脏器指数显著升高(p<0.05)。2.脾脏组织病理学切片显示:C组和Se组未见明显组织病理学变化;Cr6+组的组织病理学切片显示:中央动脉的管壁增厚、红髓和白髓的分界不清、炎性细胞浸润、淋巴细胞裂解甚至细胞核溶解。与Cr6+组比较,Se/Cr6+组脾脏组织病理学结果显示:脾脏组织中央动脉管壁变薄、红髓和白髓的分界稍清晰,炎性细胞浸润减少。3.脾脏组织氧化应激指标结果显示:与C组比较,Se/Cr6+组GSH的含量无显著变化(p>0.05),而Se/Cr6+组SOD的活性呈下降趋势(p<0.05)。Cr6+组与其他任何组GSH的含量和SOD的活性相比都显著下降(p<0.05)。与Cr6+组比较,Se/Cr6+组GSH的含量和SOD的活性明显上升(p<0.05)。与C组比较,Se/Cr6+组MDA的含量无明显变化(p>0.05);Cr6+组MDA的含量显著升高(p<0.05)。与Cr6+组比较,Se/Cr6+组MDA的含量显著下降(p<0.05)。4.肉鸡血液免疫指标结果显示:与C组比较,Se/Cr6+组和Cr6+组血清总球蛋白和所有免疫球蛋白的含量均降低(p<0.05)。但Se/Cr6+组血清总球蛋白和所有免疫球蛋白的含量均高于Cr6+组(p<0.05)。5.脾脏组织中细胞因子m RNA相对表达量的结果显示:与C组比较,Se/Cr6+组IFN-γ基因m RNA相对表达量无显著变化(p>0.05),IL-2基因m RNA相对表达量显著下降(p<0.05),Se/Cr6+组TNF-α、IL-1β、COX-2、PTGE2、INOS、IL-6和IL-10基因m RNA相对表达量均升高(p<0.05)。与C组比较,Cr6+组IFN-γ和IL-2基因m RNA相对表达量降低(p<0.05),Cr6+组的其余基因m RNA相对表达量均升高(p<0.05)。与Cr6+组比较,Se/Cr6+组IL-2基因m RNA相对表达量增加(p<0.05),Se/Cr6+组TNF-α和IFN-γ基因m RNA相对表达量无明显差异(p>0.05),而其余基因m RNA相对表达量均降低(p<0.05)。脾脏组织中细胞因子蛋白相对表达量的结果显示:与C组比较,Se/Cr6+组和Cr6+组TNF-α和COX-2蛋白相对表达量均显著升高(p<0.05),而IFN-γ和IL-2蛋白相对表达量均显著降低(p>0.05)。与Cr6+组比较,Se/Cr6+组TNF-α和COX-2蛋白相对表达量较低(p<0.05),而IFN-γ和IL-2相对表达量较高(p<0.05)。6.脾脏组织中NF-κB信号通路基因m RNA相对表达量的结果显示:与C组比较,Se/Cr6+组和Cr6+组NF-κB和IκBα基因m RNA相对表达量显著升高(p<0.05)。Cr6+组NF-κB和IκBα基因m RNA相对表达量高于Se/Cr6+组(p<0.05)。脾脏组织中NF-κB信号通路蛋白相对表达量的结果显示:Se/Cr6+组和Cr6+组NF-κB和P-IκBα蛋白相对表达量相较于C组显著升高(p<0.05)。此外,Cr6+组NF-κB和P-IκBα蛋白相对表达量高于Se/Cr6+组(p<0.05)。结论:1.Cr6+导致肉鸡脾脏组织产生明显的组织病理学损伤、氧化损伤并降低免疫功能,同时,Cr6+暴露能够造成肉鸡脾脏组织发生炎症反应。2.饲料中Se Y的添加能够通过抑制NF-κB信号通路从而减轻Cr6+中毒肉鸡脾脏组织的炎症反应。