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第一部分DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2在消化道肿瘤中的表达目的:运用免疫组化法（immunohistochemical,IHC）检测DNA错配修复（Mismatch Repair,MMR）蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2在499例消化道肿瘤中的表达,并探讨其与患者临床病理特征的相关性。方法:收集江苏泗洪人民医院经病理明确诊断为恶性肿瘤的499例消化道肿瘤患者的手术或活检标本,采用免疫组化法检测MLH1、MSH2、MSH6、PMS2四种特定DNA错配修复蛋白在肿瘤组织的表达,同时收集患者临床病理资料,探讨DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的表达与患者临床病理特征的关系。结果:1.本研究中消化道恶性肿瘤患者DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的总缺失率为10.2%（51/499）。其中DNA错配修复蛋白MLH1单一缺失率为2.8%（14/499）,PMS2 单一缺失率为 3%（15/499）,MSH2 单一缺失率为 0.6%（3/499）,MSH6单一缺失率为0.4%（2/499）;两种错配修复蛋白缺失表达情况分别为:MLH1+PMS2 缺失率 1.2%（6/499）,PMS2+MSH2 缺失率 0.4%（2/499）,MSH2+MSH6缺失率0.6%（3/499）;三种及以上错配修复蛋白缺失表达为MLH1+PMS2+MSH2 0.4%（2/499）,MLH1+PMS2+MSH6 0.6%（3/499）,MLH1+PMS2+MSH6+PMS2 0.2%（1/499）。2.DNA错配修复蛋白缺失（Deficent Mismatch Repair,dMMR）在结直肠癌、胃癌、壶腹部癌和胆囊癌发生率较高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。进一步的分析表明:（1）dMMR在结直肠癌的发生率最高（23/499）,差异有统计学意义（P＜0.01）。尤其右半结肠癌发生率最高,缺失类型主要为单一错配修复蛋白缺失。其次为胃癌（11/499）,差异有统计学意义（P＜0.05）。（正文中,胃癌的表达也是有统计学差异的?）（2）消化道肿瘤分期为Ⅱ期的患者,DNA错配修复蛋白缺失（Deficent Mismatch Repair,dMMR）（22/499）的发生率最高,缺失类型主要为MLH1和PSM2单一缺失,差异具有统计学意义（P＜0.05）。（3）在消化道肿瘤不同病理类型中,dMMR在腺癌（34/499）的发生率最高,缺失类型主要为单一缺失,差异有显著的统计学意义（P＜0.01）。结论:1.本研究中,DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2在消化道恶性肿瘤中缺失的发生率为10.2%,其中以MLH1、PMS2缺失率最高。2.DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2缺失在结直肠癌、胃癌、壶腹部癌、胆囊癌较常见,肿瘤分期以Ⅱ期发生率最高,病理类型以腺癌发生率最高,缺失类型主要为MLH1和PSM2单一缺失。第二部分DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2缺失与E-cadherin、N-cadherin、Ki-67、p53表达的相关性研究目的:探讨DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2在消化道肿瘤组织中的表达缺失与E-cadherin、N-cadherin、Ki-67、p53免疫组化指标的相关性。方法:将DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失的51例消化道肿瘤患者设为dMMR组,并选取DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达正常的消化道肿瘤53例作为pMMR组。选择的病理类型及分期相一致,以排除治疗因素对数据的影响。比较上述两组患者E-cadherin、N-cadherin、Ki-67、p53的表达,对DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失与E-cadherin、N-cadherin、Ki-67、p53的表达进行Spearman相关性分析。结果:1.DNA 错配修复蛋白 MLH1、MSH2、MSH6、PMS2 缺失（Deficent Mismatch Repair,dMMR）组与DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达正常（Proficient Mismatch Repair,pMMR）组相比,E钙黏素（E-cadherin）、N钙黏素（N-cadherin）、增殖相关的Ki-67的表达无统计学差异（P＞0.05）。dMMR与E-cadherin、N-cadherin、Ki-67 表达无显著相关性（P＞0.05）。2.抑癌基因p53突变在DNA错配修复蛋白缺失组（dMMR组）中高表达,与DNA 错配修复蛋白 MLH1、MSH2、MSH6、PMS2 表达正常（Proficient Mismatch Repair,pMMR）组相比,差异具有统计学意义（P＜0.05）。dMMR与p53突变存在相关性（r=0.312,P=0.013）。结论:DNA 错配修复蛋白 MLH1、MSH2、MSH6、PMS2 缺失与 E-cadherin、N-cadherin、Ki-67表达无显著相关性（P＞0.05）,但与p53突变呈正相关（P＜0.05）。第三部分 DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2缺失与结直肠癌临床病理特征、免疫特征的相关性研究目的:分析结直肠癌患者DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的表达与患者临床病理特征、免疫微环境特征的相关性。方法:纳入215例结直肠癌患者的临床资料为研究对象,根据是否发生DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2缺失分为缺失组（23例）和正常组（192例）,比较两组的临床病理特征。将DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失的23例结直肠癌患者纳入后续研究（dMMR组）,并选取错配修复蛋白表达正常的结直肠癌23例作为pMMR组,将两组的基本特征进行平衡,评价dMMR与CD4、CD8、CD163、PD-1、PD-L1等分子表达的相关性。结果:1、本研究的215例结直肠癌患者中,DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2的表达缺失组和正常组在患者的性别、年龄、肿瘤组织类型、分化程度上差异均无统计学意义（P＞0.05）;但在肿瘤发生部位、TNM分期方面,差异有统计学意义（P＜0.05）。2、Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌的DNA错配修复蛋白缺失率分别为15%和7.4%,两者差异有统计学意义（P＜0.05）,可能与右半结肠癌在Ⅱ期中占比高有关。3、结直肠癌 dMMR 组（23 例）与 pMMR 组（23 例）比较,CD4、CD163、PD-1、PD-L1等分子表达差异具有统计学意义（P＜0.05）。dMMR组CD4分子表达显著低于 pMMR 组（P＜0.05）,dMMR 组 CD163、PD-1、PD-L1 表达显著高于 pMMR 组（P＜0.05）;两组CD8阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。4、DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2缺失与CD4表达呈负相关（P＜0.05）,与 CD163、PD-1、PD-L1 表达呈正相关（P＜0.05）。结论:1.本研究结直肠癌患者中,DNA错配修复蛋白缺失与肿瘤的发生部位、TNM分期有关,与患者性别、年龄、组织类型、分化程度无关。2.Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌比较,DNA错配修复蛋白缺失率差异有统计学意义（P＜0.05）。3.CD4、CD163、PD-1、PD-L1在dMMR组和pMMR组的表达差异具有统计学意义（P＜0.05）,且DNA错配修复蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2缺失与CD4、CD163、PD-1、PD-L1表达存在相关性（P＜0.05）。