银杏叶提取物对肺纤维化大鼠MMP-9和TGF-β1表达的影响

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目的:探讨银杏叶提取物对博来霉素诱导的肺纤维化的治疗效果,并观察银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠肺组织病理变化以及TGF-β1、MMP-9、NF-κB的表达影响。方法:选取72只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组、肺纤维化模型对照组、吡非尼酮治疗组、银杏叶提取物高剂量治疗组、银杏叶提取物中剂量治疗组、银杏叶提取物低剂量治疗组,每组各12只。正常对照组采用气管滴注生理盐水方法,其余各组采用气管滴注博来霉素进行肺纤维化造模,造模后第8天在每组中分别各随机选取1只大鼠取全肺组织送医院病理科行病理学检测,确认造模成功后当天开始灌胃给药,正常对照组和肺纤维化模型对照组每日分别予生理盐水灌胃,吡非尼酮治疗组每日予吡非尼酮溶液50mg/kg灌胃,银杏叶提取物高、中、低剂量治疗组每日分别予银杏叶提取物100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg灌胃,各组灌胃体积均为10ml/kg。连续灌胃21天后,于造模后29天取标本进行检测,腹主动脉采血处死大鼠,采血后室温静置2h,后放入离心机低速离心20分钟,取上层血清保存于-80℃冰箱中待用,行酶联免疫法(ELISA法)测定血清中TGF-β1含量,取右肺叶置于4%多聚甲醛的容器中固定,以行HE染色和Masson染色法评估肺组织肺泡炎症和纤维化程度,免疫组化法检测MMP-9、NF-κB表达水平。结果:1.肺组织切片病理结果:与肺纤维化模型对照组相比,吡非尼酮治疗组、银杏叶提取物高、中、低剂量治疗组的肺泡炎症以及肺纤维化程度均有所下降,而吡非尼酮治疗组与银杏叶提取物高、中、低剂量治疗组比较无明显差异。2.ELISA法检测各组大鼠血清中TGF-β1水平结果:与正常对照组相比,其他各组血清中TGF-β1含量均升高,与肺纤维化模型对照组相比,吡非尼酮治疗组、银杏叶提取物高、中、低剂量治疗组血清中TGF-β1含量降低,而吡非尼酮治疗组与银杏叶提取物高剂量治疗组比较无明显差异。3.免疫组化检测各组大鼠肺组织中MMP-9、NF-κB水平结果:与正常对照组相比,其他组大鼠肺组织中MMP-9、NF-κB表达染色IOD值升高,与肺纤维化模型对照组相比,吡非尼酮治疗组、银杏叶提取物高、中、低剂量治疗组的MMP-9、NF-κB表达明显降低,MMP-9表达在吡非尼酮治疗组与银杏叶提取物高剂量治疗组中比较无明显差异,而NF-κB表达在吡非尼酮治疗组与银杏叶提取物高、中剂量治疗组中比较无明显差异。结论:1.银杏叶提取物可减轻肺纤维化模型大鼠肺部炎症浸润以及减少胶原纤维沉积,从而有预防和治疗肺纤维化的作用。2.银杏叶提取物可以通过抑制肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1、MMP-9以及NF-κB表达水平从而发挥其抑制或延缓肺纤维化的作用,这可能是银杏叶提取物治疗肺纤维化的作用机制之一。
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