本课题拟通过酵母人工染色体（YAC）技术，构建人胚系免疫球蛋白κ轻链全长基因并建立一系列的染色体大片段操作技术平台。 　　首先利用酵母高效同源重组的方法，用与YAC右臂上具有同源序列的pRNA4质粒来转化YAC宿主酵母，成功地将目的YAC的右臂修饰上ADE2基因，并将原有的URA3基因敲除掉，经过ADE2基因的修饰，宿主酵母菌落由红色变成白色。通过ADE2基因和URA3基因的转换，在酵母减数分裂过程中可以通过营养筛选进行初筛。获得了修饰有营养基因ADE2的YAC。选择了与已经制备的修饰了营养基因ADE2的YAC具有同源重叠区的另一个YAC进行酵母减数分裂同源重组，通过酵母异型接合、二倍体发孢、单孢子筛选和PCR及Southernblot等鉴定技术和方法，构建了一条长约190kb，包含人的免疫球蛋白κ轻链恒定区外显子和增强子、5个J区和4个V区(L13-B3)的YAC重组体。最后，用SalI和XbaI对单孢子重组体进行了酶切，并利用了YAC左、右臂探针及L13、Ck探针对酶切过的片段进行了Southernblot鉴定。结果发现，所制备的大小正确的重组体所在的宿主细胞有重复的YAC左臂或者右臂、YAC原有插入序列中J区和V区基因不完整。