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背景: 随着社会经济的发展,人民生活水平逐渐提高,生活方式和饮食结构上的变化,加之运动的减少使得越来越多人有肥胖症,在全球范围内肥胖人口的比例日益增加。大量的研究发现肥胖与胰岛素抵抗、糖尿病及心血管疾病的发生、发展有密切的关系,是许多代谢性疾病的共同危险因素。 脂肪组织是一个重要的内分泌器官,其能分泌多种细胞因子。研究发现肥胖患者体内常处于氧化应激状态,脂肪组织中过多产生的活性氧分子可引起多种细胞因子表达异常,从而影响机体代谢,参与或引发肥胖相关的代谢或心血管疾病,及并发症的发生和发展。因此,探讨脂肪细胞氧化应激的产生因素具有科学意义。 氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)是一类催化胺类化合物氧化脱氨的酶。可催化其反应底物如伯胺类化合物,产生相应的醛、过氧化氢及氨。有报道体内存在的甲胺,经SSAO催化生成的甲醛和过氧化氢可通过协同增强氧化应激,造成血管内皮细胞损伤。SSAO在成熟脂肪细胞中大量存在,且与细胞的分化程度有关。目前研究认为,SSAO在脂肪细胞中可参与葡萄糖的转运,具有类胰岛素的作用。但其在脂肪细胞中的确切的病理生理功能仍不甚清楚。由于成熟脂肪细胞高表达SSAO,而体内同时存在内源性底物(甲胺,氨基丙酮等),因此,我们猜测SSAO可能参与了脂肪细胞的氧化应激。本文以3T3-L1脂肪细胞为模型,以甲胺、苯甲胺为底物探讨SSAO在脂肪细胞中的病理生理意义。 目的: 观察氨基脲敏感型胺氧化酶催化其底物甲胺(MA)、苯甲胺(BZA)的氧化脱氨反应对成熟3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用。 方法: 3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞;高效液相色谱法检测不同分化天数下细胞SSAO活性的变化;MTT法检测不同浓度的MA或BZA对细胞活力的影响;荧光探针的方法检测细胞在底物作用下产生的活性氧;以0.5 mmol/L MA或BZA处理成熟脂肪细胞或未经诱导分化的前脂肪细胞4 h,观察细胞产生的甲醛(FA)、苯甲醛(BZ)、脂质过氧化指标丙二醛(MDA)、总超氧化物岐化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)的变化。 结果: SSAO活性随细胞分化天数的增加而增加,并于第8 d达到高峰;0.1~1 mmol/LMA或BZA作用细胞4 h对细胞活力无显著影响(P>0.05);在成熟脂肪细胞中,0.5 mmol/L MA或BZA孵育后,细胞产生的活性氧增高,约为阴性对照组的3到4倍,差异有统计学意义(P<0.05);MDA的含量增加,而T-SOD活性、GSH浓度降低,与阴性对照组相比,差别有统计学意义(P<0.05);在未经诱导分化的前脂肪细胞中,MA、BZA的作用下,活性氧、MDA、T-SOD和GSH的变化不明显(P>0.05)。 结论: SSAO可能通过其介导的氧化脱氨反应引起3T3-L1脂肪细胞产生氧化应激。