甲基强的松龙对家兔结核性胸水中TNF-α、TGF-β1、AQP1的影响及治疗作用

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hunshixiaozi
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[目 的]通过建立结核性胸腔积液家兔模型,观察水通道蛋白1(AQP-1)在结核性胸腔积液家兔模型的壁层胸膜组织和脏层胸膜组织上的动态表达;并通过ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)与转化生长因子β1(TGF-β1)的浓度,观察结核性胸腔积液中TNF-α和TGF-β1在结核性胸腔积液发病过程中的动态变化;向胸腔内注入甲基强的松龙,来探讨甲基强的松龙对结核性胸腔积液中TNF-α浓度、TGF-β1浓度及家兔胸膜上AQP1表达的影响,以及对结核性胸腔积液的治疗作用。[方 法]42只新西兰白兔随机分为2组,即对照组21只,与实验组(甲基强的松龙注射组)21只。通过向家兔胸腔内注射结核分枝杆菌悬液建立结核性胸腔积液家兔模型。造模过程中行胸部B超检查,了解胸腔积液及粘连、纤维板形成情况。待家兔模型建立成功后,两组家兔模型在第1、3、5、7、10、15、20天时各抽取胸腔积液1次,同时每次分别处死动物3只,取胸膜组织;实验组中剩余存活的家兔于每次抽取积液后向胸腔内注入甲基强的松龙注射液(剂量为:10mg/kg)。用ELISA法检测每次抽取胸腔积液中的TNF-α、TGF-β1的浓度,观察两者在胸腔积液中的动态变化;使用Western blot检测取下的脏层,壁层胸膜组织中AQP1的表达;并同时使用免疫组织化学染色法检测胸膜组织AQP1的表达;使用RT-PCR法检测家兔胸膜组织上AQP1基因mRNA的表达情况。[结 果]1.胸腔积液含量变化情况:对照组中家兔模型的胸腔积液含量,随着时间的延长明显上升,在15天时到达最高点。而在实验组中,家兔模型胸腔积液的体积在10天后表达下降,在20天时回到与5天时相似的水平。2.胸腔积液中TNF-α浓度变化情况:通过ELISA法检测,对照组中:从第1天到第15天,随着时间增长,胸腔积液中的TNF-α浓度呈现明显的递增趋势;在第15天,家兔模型胸腔积液中的TNF-α浓度达到峰值;从第15天到第20天,胸腔积液中的TNF-α浓度出现下降,但不明显。实验组:在前10天内,随着时间增长胸腔积液中TNF-α浓度呈现明显的递增趋势,但是每次检测都要比对照组的胸水中的TNF-α浓度低;但在第10天到第20天间,胸水中的TNF-α浓度呈现出明显下降,并且第10天到第15天呈现出的下降趋势更为明显。第15、20天,对照组与实验组进行比较,家兔动物模型胸腔积液中TNF-α浓度的差异有统计学意义(P<0.05)。3.胸腔积液中TGF-β1浓度变化情况:通过ELISA法检测,对照组中:随着时间增长,家兔动物模型胸腔积液中的TGF-β1浓度逐渐增高,在第20天时达到峰值。实验组中:在第1天到第10天家兔动物模型胸腔积液中的TGF-β1浓度呈现逐渐增高的趋势,并在第10天达到峰值;从第10天到第20天之间,胸腔积液中的TGF-β1浓度逐渐降低。第10、15、20天中,对照组与实验组进行比较,家兔动物模型胸水中TGF-β1浓度的差异有统计学意义(P<0.05)。4.胸膜组织上AQP-1表达情况:通过Western blot方法与免疫组织化学染色法发现,AQP-1在脏层胸膜细胞的胞浆和细胞核上的表达要比壁层胸膜细胞的胞浆和细胞核内的表达丰富,实验组与对照组对比后,甲基强的松龙的对胸膜组织中AQP1的表达有一定的抑制作用。5.胸膜组织上AQP1 mRNA的表达情况:通过RT-PCR实验发现,实验组胸膜组织上AQP1 mRNA的表达要比对照组胸膜组织上AQP1 mRNA的表达程度低。[结论]1.通过向家兔胸腔内注射结核分枝杆菌悬液可以成功建立家兔结核性胸腔积液模型。2.甲基强的松龙对结核性胸腔积液的产生有一定的抑制作用。3.甲基强的松龙可以对壁层胸膜和脏层胸膜上AQP1的表达起到抑制作用。4.甲基强的松龙可以降低胸腔积液中TNF-α、TGF-β1的浓度,并分别在用药第15天和第10天后效果较为明显。
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