【摘 要】
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目的:探讨鹰嘴豆芽素A（Biochanin A,BCA）对胶质母细胞瘤的抗肿瘤作用和对细胞能量代谢的影响,并揭示其中的分子机制。方法:1.选取了U251和U87细胞,用不同浓度的BCA进行不同时间处理,用CCK-8、Edu、细胞克隆和流式细胞术等验证增殖、凋亡情况;蛋白免疫印迹检测线粒体凋亡相关蛋白Max、Bcl-2的表达;HE染色观察给药BCA后裸鼠皮下移植瘤病理学改变,免疫组化分析Ki-67的
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目的:探讨鹰嘴豆芽素A（Biochanin A,BCA）对胶质母细胞瘤的抗肿瘤作用和对细胞能量代谢的影响,并揭示其中的分子机制。方法:1.选取了U251和U87细胞,用不同浓度的BCA进行不同时间处理,用CCK-8、Edu、细胞克隆和流式细胞术等验证增殖、凋亡情况;蛋白免疫印迹检测线粒体凋亡相关蛋白Max、Bcl-2的表达;HE染色观察给药BCA后裸鼠皮下移植瘤病理学改变,免疫组化分析Ki-67的表达。2.采用免疫荧光和流式细胞术检测BCA处理后U251细胞的ROS水平;用线粒体追踪器染色和电镜观察BCA是否影响细胞线粒体形态;检测线粒体动力学相关蛋白（MFN1、MFN2、OPA1、Drp1和FIS1）的蛋白表达水平。3.用海马XF24分析仪测量经BCA处理的U251细胞的耗氧率（OCR）和细胞外酸化率（ECAR）,Western blotting评估相关蛋白的表达。结果:1.BCA呈浓度依赖性和时间依赖性降低胶质母细胞瘤细胞的增殖能力;BCA降低了Bcl-2/Bax蛋白比值,增加了U251和U87细胞的凋亡;BCA处理后抑制移植瘤组织生长,且Ki-67阳性表达减少。2.BCA干预使得U251细胞生成活性氧ROS增加,线粒体变小;BCA干预使得U251细胞中MFN1和MFN2蛋白水平降低,Drp1的表达升高。3.BCA处理使U251细胞的耗氧率和细胞外酸化率降低,并且p-AKT,pm TOR,HIF-1α和糖酵解酶GLUT1、HK2和LDHA与线粒体呼吸链蛋白ND1、SDHB和ATP5A表达降低。结论:BCA诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。BCA限制胶质母细胞瘤糖酵解和线粒体氧化磷酸化。
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