【摘 要】
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灰树花（Grifolar frondosa）作为一种药食同源的食用菌,具有抗氧化、抗病毒、调节免疫力和抗肿瘤等多种作用。目前对灰树花功效成分的研究主要集中在多糖,对多肽类物质及其活性的报道较少。本研究以灰树花蛋白为研究对象,利用酶解法通过响应面试验优化灰树花多肽的制备工艺,并通过细胞试验探究灰树花多肽抗氧化活性的分子机制。试验结果如下:（1）采用酶解法制备灰树花多肽（GFPH）。通过蛋白酶的筛选,
【基金项目】
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山西省食用菌工程技术研究中心； 黄土高原食用菌提质增效协同创新中心； 食用菌山西省重点科技创新团队（201805D131009）； 山西省高等学校科技创新项目（2019L0373）； 山西省优秀博士来晋工作奖励资金科研项目（SXYBKY201722）；
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灰树花（Grifolar frondosa）作为一种药食同源的食用菌,具有抗氧化、抗病毒、调节免疫力和抗肿瘤等多种作用。目前对灰树花功效成分的研究主要集中在多糖,对多肽类物质及其活性的报道较少。本研究以灰树花蛋白为研究对象,利用酶解法通过响应面试验优化灰树花多肽的制备工艺,并通过细胞试验探究灰树花多肽抗氧化活性的分子机制。试验结果如下:（1）采用酶解法制备灰树花多肽（GFPH）。通过蛋白酶的筛选,确定采用胰蛋白酶对灰树花蛋白进行水解。以水解度和多肽含量为指标,利用单因素和响应面试验确定灰树花多肽的最佳制备工艺条件为:酶解温度46.97℃,酶解时间2.7 h,酶解p H 8.5,加酶量6613 U/g,在此条件下,水解度为28.27%,多肽含量为7.58 mg/m L。（2）利用超滤技术对GFPH进行分离,得到3个组分:GFPH-I（MW＜3 k Da）、GFPH-II（3 k Da＜MW＜10 k Da）、GFPH-III（MW＞10 k Da）,低分子量GFPH-I的体外抗氧化活性最高。MTT法测定细胞活力发现GFPH-I表现出较好的促进细胞增殖和保护H2O2诱导的RAW264.7细胞氧化损伤。采用ELISA与qRT-PCR等方法探究GFPH-I对H2O2诱导的巨噬细胞RAW264.7氧化损伤的保护作用机制。研究发现,GFPH-I能够降低H2O2诱导的氧化损伤RAW264.7细胞中MDA含量,增强SOD、CAT和GSH-Px的活力,增加抗氧化基因Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、CAT、Nrf2和HO-1的相对表达量;降低促炎信号因子TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB、i NOS和COX-2的分泌与表达,提高抗炎因子IL-4和IL-10的分泌与表达,表明GFPH-I可能是通过调节NF-κB/Nrf-2信号通路对RAW264.7细胞的氧化损伤发挥保护作用。（3）以GFPH-I和枸杞汁为原料制备复合多肽饮料,通过单因素和响应面试验确定灰树花多肽复合饮料的最佳工艺配方:添加0.8%GFPH-I、25%枸杞汁、7.309%白砂糖、0.057%柠檬酸和0.043%CMC。研制的灰树花多肽复合饮料呈橘黄色,酸甜可口,质地均匀,酸度为4.37,可溶性固形物含量为6.49%,具有较强的抗氧化活性,为抗氧化肽产品的研制和开发提供了理论依据。
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竖井贯流式泵站的结构比较复杂，各种不同厚度的流道墩墙、上部墙体等大体积薄壁结构的相互约束也比较复杂，特别是夏季施工时，温控防裂难度很大。对于不同的结构部位，如采用统一的温降速率指标，容易导致局部拉应力超过抗拉强度。利用等效冷却算法分别模拟计算泵站流道和上部墙体在不同温降速率下的温度场和应力场。结果表明：温降速率与拉应力增速基本成正比，但不同部位的比值关系不同。如采用统一的温降速率和通水时长，容易导
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