目的:本研究基于前期研究发现“运腹通经”推拿法治疗肥胖胰岛素抵抗临床有效,减脂降糖效果没有阳性药物盐酸二甲双胍显著,但中医症状积分明显高于阳性药物组,且联合药物治疗时不良事件发生率明显少于药物组,以肥胖肝脏胰岛素抵抗（Obesity hepatic insulin resistance,OHIR）为疾病载体,临床运用前瞻性随机对照试验（Randomized Controlled Trial,RCT）,针对身心整体对干预全过程进行全方面、多维度的评价,分析“运腹通经”推拿法辅助治疗肥胖肝脏胰岛素抵抗的协同增效、缓解药物副反应、提高生存质量等辅助临床效应。同时,采用转录组测序（Seq RNA）、透射电镜等技术,对“运腹通经”推拿法辅助治疗肥胖肝脏胰岛素抵抗的肝脏差异表达m RNA、small RNA、noncoding RNA等基因进行分析,拟挖掘肝脏差异表达基因的分布信号通路,探索“运腹通经”推拿对肝脏多基因、多靶点、多通路的网络生物学调控,实现辅助效应,为进一步明确“运腹通经”推拿治疗肥胖肝脏胰岛素抵抗的临床辅助效应与机制提供思路与方法,为临床减少药物使用,以患者身心整体全过程评价的评价方式提供参考。方法:1.临床研究基于前提疗效研究基础开展前瞻性RCT辅助,采用糖尿病中医症状评分（TCM symptom score scale,TCMSSS）作为主要结局指标,健康调查评分（the MOS item short from health survey,SF-36）、记忆症状评评分（Memorial symptom assessment scale,MSAS）、汉密尔顿焦虑评分（Hamilton Anxiety Scale,HAMA）、以及不良反应发生率等作为次要结局指标,通过122个条目,21个维度,从患者身心整体对“运腹通经”推拿联合药物和药物组（非经非穴按压非联合盐酸二甲双胍片）全过程进行评价。2.差异表达基因分析及相关机制探索治疗6周后,采集各组大鼠肝脏组织、白色脂肪组织、骨骼肌组织等,提取各组大鼠肝脏组织总RNA（Total Ribonucleic Acid,Total RNA）,质检合格并完成文库构建后,采用Illumina Hi Seq测序平台对样本进行高通量测序,进而对筛选出的显著差异表达的m RNA、small RNA、noncoding RNA等基因进行聚类分析,基因富集（Gene Ontology,GO）功能分析,京都基因和基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Gene and Genomes,KEGG）通路富集分析,差异m RNA、small RNA、noncoding RNA等基因与靶基因互作分析,并最终挑选出与“运腹通经”推拿辅助临床效应可能相关的差异基因进行即时荧光定量聚合酶链锁反应（Quantitative real time polymerase chain reaction,RT-PCR）验证。同时分析关键基因分布主要信号通络,结合KEGG通路富集分析结果,探索“运腹通经”推拿辅助临床效应可能相关信号通路,并对推测信号通路的关键蛋白进行Western Blot检测。结果:1.临床研究从入组开始到第10周随访结束,TCMSSS评价:推拿具有一定的量效积累,药物前2周不良反应大于其产生的临床效应;推拿联合药物组、药物组相比,其TCMSSS评分下降更多,且两组之间统计有显著差异（P＜0.001）。SF-36评价:推拿联合药物组与药物组对生活质量SF-36 PF、RP、BP、GH、VT、SF、RE、MH、HT9个方面均有改善,且推拿联合药物组在SF-36各方面评分下降更多,两组之间差异有统计学意义（P＜0.05）,特别是躯体疼痛（BP:Bodily Pain）、精力（VT:Vitality）两个维度上两组之间统计有显著差异（P＜0.001）。MSAS评价:推拿具有一定的量效积累,且MSAS评分下降更多,且两组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。HAMA评价:与基线比较,其差值均逐渐增大,分别呈波形变化,其中推拿联合药物组治疗期间逐渐下降,且治疗两周后下降速度更快,随访期略有回升,药物组先升高后下降。组间比较:推拿联合药物组、药物组相比,其HAMA评分下降更多,且两组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。此外,在第6周治疗结束后,两组肥胖肝脏胰岛素抵抗患者猜测他们获得“运腹通经”推拿的人数一致,二组之间差异无统计学意义（P=0.846＞0.05）,盲法实施较好。而两组间不良反应发生率有显著差异（P=0.00012＜0.01）,推拿联合药物组明显较药物组不良事件发生率及不良临床表型出现较少。2.实验研究肥胖状态的影响:体重及Lee’s Index,干预6周后,与Model组相比,Massage组、Drug组、Mas+Drug组均对OHIR大鼠有减重疗效且对肥胖状态有改善作用（*P＜0.05）,且Mas+Drug组减重疗效优于Drug组（#P＜0.05）;与Blank组相比,Blank+Mas组大鼠平均体重和Lee’s Index低于空白组（＆P＜0.05）。肝酶的影响:与Model组相比,Massage组、Drug组、Mas+Drug组均对OHIR大鼠肝酶ALT、AST表达具有调节作用（*P＜0.05）,且Mas+Drug组对OHIR大鼠肝酶ALT、AST表达具有调节作用优于Drug组（#P＜0.05）;与Blank组相比,Blank+Mas组大鼠肝酶ALT、AST表达量平均值低于空白组（＆P＜0.05）。血糖、血脂的影响:与Model组相比,Massage组、Drug组、Mas+Drug组均对OHIR大鼠血脂TG、TC水平具有下调作用（*P＜0.05）,且Mas+Drug组对OHIR大鼠血脂TG、TC水平下调作用优于Drug组（#P＜0.05）;与Blank组相比,Blank+Mas组大鼠血脂TG、TC水平平均值低于空白组（＆P＜0.05）。胰岛素敏感性的影响:与Model组相比,Massage组、Drug组、Mas+Drug组均对OHIR大鼠血液中FBG、FINS、C肽含量具有下调作用,同时可以提高胰岛素敏感性,改善肥胖胰岛素抵抗状态（*P＜0.05）,且Mas+Drug组对OHIR大鼠血液中FBG、FINS、C肽含量下调作用、胰岛素敏感性提高和胰岛素抵抗状态改善均优于Drug组,（#P＜0.05）;与Blank组相比,Blank+Mas组大鼠血液中FBG、FINS、C肽含量平均值低于空白组（＆P＜0.05）。OGTT的影响:空腹状态下,Model组大鼠血糖明显高于Blank组,同Model组相比,Massage、Drug及Mas+Drug干预后各组0～120min血糖曲线下面积均明显下降（*P＜0.01）,且Mas+Drug优于Drug组,（#P＜0.05）;与Blank组相比,Blank+Mas组大鼠血糖曲线下面积值低于空白组（＆P＜0.05）。肝组织形态学的影响:干预6周后,光镜下及透射电镜下观察均可见Blank+Mas组、Blank组大鼠肝组织结构完;Model组大鼠肝脏存在明显脂质沉积,肝细胞空泡变性及水样变性,并有炎性细胞浸润,少量肝细胞点状坏死。而Massage组、Drug组及Mas+Drug组肝脏空泡变性明显降低(（*P＜0.01）,且Mas+Drug组优于Massage组,Massage组优于Drug组,（#P＜0.05）;3.差异表达基因分析（1）关键差异表达基因比对通过测序结果,Drug VS Mas Drug上调差异基因和下调差异基因数量为264个,其中上调最明显的是基因Nim1k,下调最明显的是基因Lcn12;Massage VS Mas Drug上调差异基因数量为284个、下调差异基因数量为301个,其中上调最明显的是基因Gstt3,下调最明显的是基因Sds;Massage VS Drug上调差异基因数量为109个、下调差异基因数量为105个,其中上调最明显的是基因Plaat1,下调最明显的是基因Nudt10;Model VS Mas Drug上调差异基因数量为320个、下调差异基因数量为216个,其中上调最明显的是基因Gck,下调最明显的是基因Cfap126;Model VS Massage上调差异基因数量为196个、下调差异基因数量为194个,其中上调最明显的是基因Slc25a30,下调最明显的是基因Slc35c2;Model VS Blank上调差异基因数量为112个、下调差异基因数量为78个,其中上调最明显的是基因RT1-CE10,下调最明显的是基因LOC100909524。（2）GO分析6周治疗后,推拿联合药物组与药物组（Drug VS Mas Drug）进行比较,比对得出显著差异基因585条。通过top GO进行GO富集分析,得到7031差异GO terms,其中BP 5521个、CC 471个、MF 939个,前20条中,涉及生物过程的正调控、发育过程的调控、细胞过程的正调控、细胞分化调控、氧传输、发展过程的积极调节等生物学过程16个,细胞外基质、含胶原的细胞外基质、基膜等细胞组件3个,氧载体活性等分子功能1个。（3）KEGG Pathway分析6周治疗后,将推拿联合药物组与药物组（Drug VS Mas Drug）进行比较,经KEGG Pathway分析发现,发现“运腹通经”推拿辅助治疗后与肥胖肝脏胰岛素抵抗相关的AGE-RAGE信号通路中COL1发生上调表达,IL1发生下调表达;PI3K-Akt信号通路中P21发生上调表达;Jak-STAT信号通路中P21发生上调表达,AOX、SOCS发生下调表达。对P21、COL1、IL1a、AOX1、SOCS1进行RT-PCR验证,验证结果表明两组治疗前后P21、COL1、IL1a、AOX1、SOCS1表达变化差异均具有统计学意义（P＜0.05）。4.差异表达基因Real-time PCR验证及网络生物学效应验证干预6周后,采用Real-time PCR检测,与模型组相比,推拿联合药物治疗组大鼠基因P21、COL1、SOCS1表达水平显著提升（*P＜0.01）,基因IL1a、AOX1表达水平较低（*P＜0.05）;与药物组相比,推拿联合药物治疗组大鼠基因P21、COL1、SOCS1表达水平较高（#P＜0.05）,基因IL1a表达水平偏低（#P＜0.05）;与药物组相比,推拿治疗组大鼠基因P21、COL1、SOCS1表达水平相当（§P＞0.05）,基因IL1a表达水平显著下降（§P＜0.01）。经Western Blot检测,与模型组相比,运腹通经推拿联合药物组PI3K、AKt、p-AKt、mTOR、p-mTOR,AEGs、RAGE、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达量显著降低,JAK2、STATA3、p-STAT3蛋白表达量显著上升（*P＜0.01）;与空白组相比,运腹通经推拿联合药物组蛋白表达量相当（**P＞0.01）,空白推拿组蛋白表达量偏低（＆P＜0.05）;与药物组相比,运腹通经推拿联合药物组蛋白表达量较低（#P＜0.05）,运腹通经推拿组蛋白表达量偏低（##P＜0.05）。结论:1.“运腹通经”推拿可预防肥胖肝脏胰岛素抵抗的发生,对OHIR患者具有减重降脂、提高胰岛素敏感性等作用,效果不如盐酸二甲双胍,但与药物联合使用能起到协同增效的作用,减少不良反应的发生,同时能保护或修复肝损伤、有效改善生活质量、调节身心状态、缓解肥胖焦虑等辅助临床作用。2.采用Seq RNA测序揭示了在OHIR患者中存在异常表达的RNA,临床“运腹通经”推拿可能调节OHIR患者肝脏m RNA,small RNA,noncoding RNA基因的表达水平从而产生辅助临床效应。3.临床“运腹通经”推拿法治疗OHIR可能是通过调控AGEs-RAGE信号通路中COL1、IL1,PI3K-Akt信号通路中P21;Jak2-STAT3信号通路中P21、AOX、SOCS相关基因的表达进而调控AGEs-RAGE/PI3K-Akt/Jak2-STAT3网络路径,从而起到辅助治疗效果,但仍需进一步的对其他相关组织开展研究加以验证。