【摘 要】
：
第一部分EZH2介导组蛋白H3K27me3失衡在感染后喘息中的作用目的:探讨EZH2介导的组蛋白H3K27me3甲基化修饰失衡在感染后喘息中甲基化调控作用,为临床防治喘息性疾病提供新思路。方法:选择在本院因肺部感染行纤维支气管镜检测的患儿作为研究对象,并根据是否伴发喘息分成非喘息组（诊断为哮喘性支气管炎、哮喘性肺炎及毛细支气管炎不伴喘息,未予阿奇霉素防治）和喘息组（诊断为哮喘性支气管炎、哮喘性肺炎
论文部分内容阅读
第一部分EZH2介导组蛋白H3K27me3失衡在感染后喘息中的作用目的:探讨EZH2介导的组蛋白H3K27me3甲基化修饰失衡在感染后喘息中甲基化调控作用,为临床防治喘息性疾病提供新思路。方法:选择在本院因肺部感染行纤维支气管镜检测的患儿作为研究对象,并根据是否伴发喘息分成非喘息组（诊断为哮喘性支气管炎、哮喘性肺炎及毛细支气管炎不伴喘息,未予阿奇霉素防治）和喘息组（诊断为哮喘性支气管炎、哮喘性肺炎及毛细支气管炎伴喘息,未予阿奇霉素治疗）,同时设立对照组（诊断为支气管异物急性期、先天性喉软骨发育不良、气道畸形且均不伴感染）。此外根据患儿治疗情况再将喘息组分为两组:喘息组（静脉滴注不含阿奇霉素的5%葡萄糖注射液,其余常规治疗）;喘息+阿奇霉素组（静脉滴注含阿奇霉素的5%葡萄糖注射液,剂量为10 mg/kg·d,其余处置同喘息组）;其中将喘息+阿奇霉素组根据是否感染支原体再分为支原体阳性组和支原体阴性组。收集每组患儿的支气管肺泡灌洗液（BALF）,1500 rpm、4℃离心10分钟,分离上清与沉淀。进行如下检测:（1）流式微球阵列术检测BALF中白介素IL-2、IL-6、IL-10、INF-γ水平;（2）免疫荧光染色检测BALF中巨噬细胞组蛋白H3K27me3甲基化水平及EZH2的表达水平;（3）ELISA检测BALF中巨噬细胞相关炎症因子在感染后喘息中的变化规律;结果:（1）流式微球阵列术结果表明,与对照组及非喘息组比较,喘息组BALF中IL-2、IL-6表达水平均显著提高（均P＜0.05）,IL-10表达水平显著降低（P＜0.05）;而对照组与非喘息组无显著差别（均P＞0.05）。BALF中INF-γ表达水平在三间组无统计学差异（均P＞0.05）。（2）免疫荧光染色检测结果显示,与对照组相比,喘息组EZH2及组蛋白H3K27me3表达水平显著增高（P＜0.05）。（3）ELISA结果显示,与喘息组相比,喘息+阿奇霉素组IL-6表达水平显著降低（P＜0.05）,而IL-2和IL-10表达水平显著增高（均P＜0.05）。结论:（1）组蛋白甲基转移酶EZH2介导的组蛋白H3K27me3甲基化可能参与了儿童感染后喘息的发生。（2）阿奇霉素可能标化巨噬细胞相关炎症因子分泌异常从而改善喘息。第二部分NF-κB信号通路介导组蛋白H3K27me3甲基化修饰失衡在阿奇霉素抑制肺部炎症中的作用目的:探讨NF-κB信号通路介导的组蛋白甲基化修饰失衡在阿奇霉素非特异性抗炎中的调控作用,为临床防治炎症后喘息提供新的干预靶点。方法:培养大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）,随机将实验对象分为8组:Control组;Vehicle组（等体积DMSO）;LPS组（LPS 2μg/m L）;AZM组（LPS 2μg/m L+AZM 8μg/m L）;GSK126组（LPS 2μg/m L+GSK126 4μg/m L）;SN50组（LPS2μg/m L+SN50 8μg/m L）;AZM+GSK126组（LPS 2μg/m L+AZM 8μg/m L+GSK126 4μg/m L）;AZM+SN50组（LPS 2μg/m L+AZM 8μg/m L+SN50 8μg/m L）;收集干预24小时NR8383细胞进行以下检测:（1）免疫印迹技术（Western blot,WB）检测Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）、p65、磷酸化p65（p-p65）、EZH2、磷酸化EZH2（p-EZH2）、H3K27me3、白介素-10（Interleukin 10,IL-10）蛋白表达水平;（2）免疫荧光染色检测p65入核情况。（3）免疫共沉淀（Co-IP）检测组蛋白H3K27me3与组蛋白甲基转移酶EZH2及p65蛋白之间的相互作用关系。结果:（1）WB结果显示,LPS组较Control组TLR4、p65、p-p65、EZH2、p-EZH2、H3K27me3均显著增高（均P＜0.05）,而IL-10显著降低（P＜0.05）;与LPS组比较,AZM组、GSK126组、SN50组、AZM+GSK126组及AZM+SN50组TLR4、p65、p-p65、EZH2、p-EZH2、H3K27me3均显著降低（均P＜0.05）;而IL-10显著增高（P＜0.05）。（2）Co-IP结果显示,组蛋白H3K27me3与组蛋白甲基转移酶EZH2及p65蛋白之间可以相互结合。（3）免疫荧光检测结果显示,AZM（8μg/m L）或SN50（4μg/m L）能够显著抑制LPS诱发的NR8383细胞NF-κB p65核转位。结论:NF-κB信号通路参与的EZH2介导的组蛋白H3K27me3甲基化修饰可能是阿奇霉素发挥非特异性抗炎作用的关键通路之一。
其他文献
目的:探讨移植物抗宿主（Graft versus host disease,GVHD）患者淋巴细胞亚群分布变化规律,研究利用细胞表面标志物筛选出的特定淋巴细胞亚群在GVHD疾病进展和预后的作用。方法:募集2020年10月至2022年2月遵义医科大学附属医院、第二附属医院与新桥医院血液病医学中心接受造血干细胞移植后同时保持规律随访的相关患者作为研究对象,其中包括发生慢性移植物抗宿主病患者（chron
目的:探讨吲哚菁绿（Indocyanine green,ICG）荧光在复杂肝段肝细胞癌肝切除中的应用,为复杂肝段肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）在手术治疗上提出一种可行性方案。方法:回顾性分析贵州省人民医院肝胆外科2019年7月至2021年7月共42例行腹腔镜肝切除（Laparoscopy Hepatectomy,LH）患者资料,术前或术后病理证实为肝细胞癌。将
目的:观察COPD患者肺组织中IL-17A、支气管成纤维细胞自噬的变化,初步探讨COPD患者肺组织中IL-17A表达及支气管成纤维细胞自噬与气道重塑的关系。方法:1.实验分组及取材:选取我院胸外科肺叶切除患者肺组织标本,无COPD组（对照组）10例,COPD组10例（6例满足COPD临床诊断,4例满足COPD病理改变）。所有标本取材均为远离病灶边缘5cm。2、HE染色的方法观察肺组织病理改变。3、
在当前的汽车产业发展过程中,网络化、电气化、共享化以及智能化已经成为必不可少的创新元素,也是整个行业高度认可的发展方向。随着汽车生产技术不断进步,汽车座舱的交互方式、功能、结构也发生一系列改变,为人们带来了极大的便捷。尤其是智能座舱是汽车设计领域不可忽视的重要元素,可以作为吸引消费者的一大创新点。随着自动驾驶技术持续发展,智能座舱中的显示屏作为人机交互的主界面,肩负着智能化的大旗。除了娱乐系统,对
目的:研究Apelin对高盐喂食C57BL/6J小鼠肾脏纤维化的影响及ACE2-Ang（1-7）-Mas R轴在其中的作用。方法:野生型（wild type,WT）雄性C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为对照组（WT NS组,含0.5%Na Cl饲料）,对照+Apelin组（WT NS+AP组,含0.5%Na Cl饲料,实验第14-18周腹腔注射1μg/10mg[Pyr~1]-Apelin-1
目的:探讨鼠性成熟前期一侧睾丸扭转对性成熟期健侧睾丸的影响,以及对处于不同状态的扭转睾丸、予以何种处理方式,对性成熟期健侧睾丸的损害最小,用以指导临床。方法:3周龄的SD大鼠56只,按随机表法将实验动物分为7组,分别为对照组（CG）、扭转未坏死睾丸复位组（NNTR）、扭转未坏死睾丸切除组（NNTO）,扭转疑似坏死睾丸复位组（SNTR）、扭转疑似坏死睾丸切除组（SNTO）,以及扭转坏死睾丸复位组（N
目的:观察主动脉瓣病变合并升主动脉扩张术后变化情况;探讨主动脉瓣病变合并升主动脉扩张（40-50mm）的患者手术方式的选择以及对不同手术方式术后患者生活质量进行比较。方法:回顾性分析2017年4月-2021年06月在贵州省人民医院因主动脉瓣疾病合并升主动脉扩张（40-50mm）需要外科手术的患者,排除“马凡综合征”、“主动脉夹层”患者,共入组43例,数据不完整及失访3人,最终纳入统计40人。根据手
目的:以大鼠多巴胺能神经元细胞系（简称“N27”细胞）构建慢病毒细胞稳转株,探讨mi RNA-nov-1/Dhrs3在锰致N27细胞凋亡中的调控机制,以及m TOR信号通路关键分子变化的特点,进一步阐明锰致神经毒性的分子机制。方法:1.N27细胞分为以下2组:Mn Cl20μmol/L（空白对照组,Control组）、300μmol/L（模型组,Model组）24h。CCK8检测细胞活力,West
目的:探讨腹腔镜辅助改良Soave术治疗先天性巨结肠（HSCR）术后早期并发症（≤30天）的Clavien-Dindo（CD）分级情况及影响因素。方法:回顾性分析2010年1月至2020年12月期间,在我院接受腹腔镜辅助改良Soave术的患者临床资料。根据患者术后早期并发症发生情况,分为并发症组和非并发症组。收集患者的一般情况（性别、年龄、首次就诊原因、临床类型、术前是否发生小肠结肠炎（HAEC）
目的:探索三镜联合早期治疗急性胆源性胰腺炎（Acute biliary pancreatitis,ABP）的可行性、安全性、有效性。方法:选取2015年1月-2020年12月成都市第二人民医院肝胆外科收治的ABP患者。术前所有患者经超声、CT、MRI、MRCP及淀粉酶、脂肪酶、胆红素、转氨酶等指标诊断为ABP,并满足纳入及排除标准、RANSON评分≤3分等条件的患者,作为本次研究的对象。根据目前治