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随着鲍养殖业的快速发展,鲍的加工规模也在逐年提高。然而,在加工中占鲍体重约25%的脏器被大量废弃,造成严重的资源浪费和环境污染。已有研究表明,鲍脏器内含丰富的营养成分和一些生理活性物质,具有良好的开发前景。本论文以福建省海域皱纹盘鲍内脏为原料,联合应用生物酶解和膜分离技术制备鲍内脏粗多糖,利用阴离子交换柱层析和凝胶柱层析技术对粗多糖进行分离纯化,并对其抗氧化活性进行评价,以期为皱纹盘鲍脏器综合加工利用提供依据。论文主要研究结果以下:利用二次酶解、超滤法提取制备鲍内脏粗多糖,可获得较高的多糖得率和产物纯度:以碱性蛋白酶一次酶解,利用响应面优化酶解条件为酶解时间19 h、料液比1:39、加酶量3500 U/g,多糖得率为13.62%;选用截留分子量10 kDa的超滤膜对酶解液中多糖与小分子蛋白肽进行分离,多糖截留率可达82.11%;选择风味蛋白酶进行二次酶解脱蛋白,酶解液再经过超滤,制备所得鲍内脏粗多糖样品纯度为51.75%。鲍内脏粗多糖(CAVP)经DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换柱层析和Sephacryl S-300HR凝胶柱层析纯化后,得到三种多糖组分:AVP1、AVP2、AVP3。三种多糖组分的单糖组成均含有甘露糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖。且红外光谱分析,三者的糖苷键同属吡喃型。其中,AVP1为淡黄色絮状粉末,多糖含量62.75%,蛋白含量10.54%,硫酸根含量7.14%,分子量14.99 kDa,均方旋转半径11.40 nm,为无规则线团构象。AVP2为深褐色的粉末,是一种多糖含量23.09%、蛋白含量36.41%的蛋白多糖,硫酸根含量1.64%,分子量58.48 kDa,均方旋转半径37.00 nm,为近似球状构象。AVP3为黄褐色的絮状粉末,多糖含量44.67%,蛋白含量19.24%,硫酸根含量4.92%,分子量39.63 kDa,均方旋转半径19.50 nm,为近似球状构象。鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP3具有明显的体外清除DPPH自由、羟自由基活性,但超氧阴离子的清除能力弱。三种多糖清除DPPH·的IC50值分别为1.46 mg/mL、1.74mg/mL和1.55 mg/mL,清除·OH的IC50值分别为7.14 mg/mL、15.27 mg/mL和8.11 mg/mL。鲍内脏多糖CAVP、AVP1、AVP3在0.5 mg/mL-4 mg/mL浓度对肝细胞(LO2)的H2O2氧化损伤有保护作用,三个多糖样品均能显著提高LO2细胞存活率;CAVP(4 mg/mL)、AVP1(0.5 mg/mL)和AVP3(0.5 mg/mL)能极显著降低细胞氧化损伤时LDH的释放(p<0.01);CAVP能极显著提高LO2细胞内GSH-Px(4 mg/mL)、CAT(0.5 mg/mL)、SOD(0.5 mg/mL)活力(p<0.01);浓度为4 mg/mL时,AVP1能极显著提高LO2细胞内GSH-Px、SOD活力(p<0.01),显著提高CAT活力(p<0.05);AVP3分别在浓度0.5 mg/mL、4 mg/mL时极显著提高LO2细胞内CAT、SOD活力(p<0.01);浓度为4 mg/mL时,CAVP(p<0.05)、AVP1(p<0.05)、AVP3(p<0.01)能显著降低H2O2诱导的LO2细胞氧化损伤产生的脂质过氧化产物MDA的生成。