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狗肝菜为爵床科植物狗肝菜属狗肝菜(Dicliptera chinensis(L.)Ness)的干燥全草,主产于福建、台湾、广东、广西等地。味甘、苦,性微寒。主要功效是清肝热,凉血生津,除湿火骨痛,斑疹发热。主要用于治疗血尿,感冒发热,肺热咳嗽,结合膜炎,带状疱疹,黄疸,肝热头痛,无名肿毒。2004年,广东省食品药品监督管理局首次将狗肝菜编入《广东省中药材标准》,正式把狗肝菜列入地方中药标准。实验室前期工作表明,狗肝菜多糖保肝作用的活性部位为6000Da以下多糖部位,因此本文对狗肝菜多糖该活性部位进行分离纯化,并对分离得到的均一多糖组分进行结构解析以及保肝活性初步研究。主要研究内容如下:1、狗肝菜多糖活性部位的分离纯化通过采用二乙胺基乙基DEAE-52纤维素离子交换柱层析法、葡聚糖凝胶G-50柱层析法对狗肝菜多糖活性部位进行分离,采用凝胶渗透色谱法(GPC)进行纯度鉴定以及分子量测定。2、狗肝菜多糖P1D、P2D及P4D的初步结构解析采用红外光谱法(IR)、气相色谱法(GC)对狗肝菜多糖P1D、P2D及P4D的结构进行初步分析。3、狗肝菜多糖P1D、P2D及P4D对CCl4致L-02肝细胞损伤的保护作用研究通过检测L-02肝细胞的细胞存活率、培养上清液中ALT与AST的活性、肝细胞中MDA含量和SOD活力性等指标来评价P1D、P2D及P4D对CCl4损伤L-02肝细胞的影响。实验结果如下:1、经DEAE-52、G-50和GPC,最终得到三个均一多糖组分P1D、P2D和P4D,其分子量分别为12943Da、7261Da、15259Da。2、由红外光谱法和气相色谱法得知P1D为多糖,并含有β-吡喃糖环,含有鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖,5种单糖摩尔比为1:0.82:0.27:0.33:0.99。P2D为多糖,含有鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-葡萄糖、D-半乳糖,4种单糖摩尔比为1:3.20:0.99:1.32。P4D为多糖,含有鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖,5种单糖摩尔比为1:0.59:0.55:0.44:0.93。3、实验结果表明狗肝菜多糖P1D、P2D和P4D能显著提高CCl4损伤L-02肝细胞存活率、降低ALT、AST水平,降低MDA含量,提高SOD活性,具有明显的体外抗CCl4致L-02肝细胞损伤的作用。P1D、P2D和P4D均存在剂量效应关系,即多糖浓度越高,效果越好。其中P4D作用最好,P1D作用次之,P2D作用最差。