制草乌甘草配伍对类风湿关节炎作用及重楼皂苷代谢研究

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本论文全面评价了制草乌甘草配伍对类风湿关节炎的药效作用,研究其治疗类风湿关节炎的药效基础;并针对制草乌甘草组合中主要指标成分研究其配伍前后药代动力学参数的变化,同时初步以探针药物法探讨制草乌甘草配伍对细胞色素CYP450酶的活性影响,以期阐明甘草对制草乌的减毒机制。采用抗炎镇痛及免疫炎症模型对制草乌甘草进行抗类风湿关节炎药效评价。结果显示制草乌甘草醇提物对于卵清蛋白所致的小鼠足趾肿胀和二甲苯所致的小鼠耳肿胀具有较好的抑制作用,高剂量组的抑制率分别为37.3%和43.2%,表明具有抗急性炎症作用;在弗氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎实验中,对于佐剂引发的大鼠原发性和继发性足趾肿胀均有较好的抑制作用,高剂量组抑制率最高可分别达到为43.1%和51.4%,同时可以减少大鼠关节炎指数评分,表明该药对特异性炎症也具有抑制作用,并采用LC/MSn技术对制草乌甘草醇提物灌胃给药的大鼠血清进行成分分析,共分析鉴定了黄酮、三萜、生物碱等15种成分;在镇痛实验中,制草乌甘草能够减少醋酸所致的小鼠扭体次数,对福尔马林镇痛模型也显示较好的镇痛效果,同时能够提高小鼠的热板痛阈值,表明制草乌甘草醇提物具有较好的镇痛活性。制草乌甘草配伍给药后,制草乌中的生物碱成分和甘草中三萜类及黄酮类成分的体内代谢过程均发生改变,两者合用后能减少生物碱的体内吸收,新乌头碱和乌头碱的AUC值分别下降40.5%和14.1%,同时甘草中的三萜类和黄酮类成分体内吸收也相应减少。采用―Cocktail‖探针药物法,研究制草乌甘草配伍对细胞色素P450酶体内活性的影响,研究表明制草乌与甘草合用后,能够诱导CYP3A和CYP1A2的活性,而对CYP2A6酶几乎没有影响。以上研究为进一步探索制草乌甘草配伍的药效机理,深入研究其配伍规律机制奠定了基础。此外,采用LC-MS/MS技术对重楼皂苷进行了大鼠体内的药代动力学研究,并通过UPLC/Q-TOF/MS对重楼皂苷的尿样和粪样代谢物进行了分析鉴定,推测其在体内的排泄途径主要为脱糖基化。
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