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本课题从研究林可链霉菌的发酵培养基组成优化以及发酵过程的代谢调控为重点,提高林可霉素产量。
首先探索林可霉素发酵培养基中的重要组分——葡萄糖和玉米浆对发酵结果的影响,通过改变二者的配比使林可霉素产量提高19.6%。
课题研究糖酵解途径抑制剂——柠檬酸钠和氟化钠对林可霉素发酵的影响。在15L发酵罐中,分别于48h添加0.05g/L柠檬酸钠和于96h添加0.1g/L氟化钠,最终林可霉素效价为5898u/ml和5795u/ml,比对照提高13.4%和12.6%。分别研究了柠檬酸钠和氟化钠对糖代谢关键酶的影响,实验结果表明这两种物质都能抑制糖酵解途径中关键酶——丙酮酸激酶的活性,使碳源更多流向磷酸戊糖途径,此途径为林可霉素合成提供更多前体,强化了林可霉素的合成途径。
金属离子对林可霉素发酵有促进作用。在48h分别加入0.0002mol/L Cu2+和Mn2+林可霉素效价提高显著。在15L发酵罐放大实验表明,锰离子在发酵前期活化丙酮酸激酶,最终林可霉素产量提高9%。