【摘 要】
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血清型与细菌的致病性密切相关,是应用最为广泛的致病菌检测、分型和溯源工具之一。然而,传统血清学鉴定方法虽被广泛使用,但也存在诸多缺陷。细菌表面多糖抗原主要包括热稳定性菌体抗原（O抗原,O-antigen）和荚膜多糖抗原（K抗原,capsule）,具有高度的结构多样性,并决定了血清型的多样性。参与细菌表面多糖抗原合成的基因具有高度遗传学多样性,是表面多糖抗原多样性的直接原因,是开发血清型分子分型体系
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血清型与细菌的致病性密切相关,是应用最为广泛的致病菌检测、分型和溯源工具之一。然而,传统血清学鉴定方法虽被广泛使用,但也存在诸多缺陷。细菌表面多糖抗原主要包括热稳定性菌体抗原（O抗原,O-antigen）和荚膜多糖抗原（K抗原,capsule）,具有高度的结构多样性,并决定了血清型的多样性。参与细菌表面多糖抗原合成的基因具有高度遗传学多样性,是表面多糖抗原多样性的直接原因,是开发血清型分子分型体系,以及进行血清型分子鉴定的基础和良好材料。本论文围绕三种致病菌开展了血清型分子分型体系的开发和鉴定工作。第一,利用基因组学、比较基因组学和传统血清学手段,鉴定了9株副溶血弧菌中3个新的K抗原血清型。其中7株菌为近年来我国沿海地区副溶血弧菌中分离率较高的KUT2型,不同的是,除了O4:KUT2外,O3:KUT2和O11:KUT2型在我们的研究中首次被发现。通过基因组水平的进化分析,我们还发现,一株血清型为O1:KUT的菌株与全球多地引发局部大流行的菌株进化距离接近,且毒力因子分布相同,提示了这一菌株引起局部大流行的可能性。第二,鉴定了3株肠致病性大肠杆菌新的血清型。对于EPEC001和EPEC080 2株大肠杆菌,我们通过基因组学手段发现了各自潜在的O抗原合成基因簇,并通过基因缺失和互补实验验证了上述基因簇合成O抗原方面的功能;之后,还初步研究了O抗原在细胞黏附方面的作用。对于大肠杆菌LL004,我们在破译其O抗原合成基因簇的同时,还通过O抗原化学结构的解析、基因缺失和互补实验,多角度证实了其代表一种新的O抗原血清型。第三,我们通过基因组学和传统血清学手段,首次建立了摩根摩根菌的血清型分子分型体系,并进一步开发了用于该菌血清型鉴定的液相芯片检测技术,对于DNA的检测灵敏度可达到0.1 ng。本论文对于副溶血弧菌和大肠杆菌全方位的血清型鉴定,进一步扩展了上述致病菌的血清型分型体系。摩根摩根菌血清型分子分型体系的建立和液相芯片检测手段的开发则首次为该致病菌的血清型检测提供了理论依据和技术手段。
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