带CNTF的PLGA神经导管桥接修复大鼠坐骨神经缺损对神经的再生诱导作用

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目的:探讨带CNTF的聚乳酸聚羟基乙酸共聚物神经导管桥接修复大鼠坐骨神经缺损对神经的再生诱导作用。方法:实验动物均由山东大学动物实验中心提供的健康雄性wistar大鼠,大鼠均为SPF级,体重220g-250g。各组大鼠均采用盐酸氯胺酮腹腔注射麻醉(100mg/kg),麻醉后分别于显微镜下显露左后肢梨状肌并显露坐骨神经,找到梨状肌并将此肌肉下缘作为标志,距下缘约5mm处行锐性切断大鼠坐骨神经并任由两断端自由回缩,观察缺损距离,自远断端切除一段长约4-5mm神经干,制成长约10mm的大鼠坐骨神经缺损模型。通过利用注入三维凝胶状态CNTF(睫状神经生长因子)的聚乳酸聚羟基乙酸共聚物神经导管(山东省济南市岱罡生物科技有限公司提供)桥接修复大鼠坐骨神经约10mm的缺损(A组),并与未添加CNTF三维凝胶的聚乳酸聚羟基乙酸共聚物神经导管桥接修复(B组)及自体神经移植修复组(C组)形成对照。术后动态观察各组伤口愈合及足底溃疡的愈合以及患肢的活动情况。术后14周解剖显露桥接部分坐骨神经,观察导管的大体形态及桥接部分神经的再生情况,并对再生神经进行神经电生理检测并与对照组神经电位峰值进行比较。取再生部分的神经的中1/3段行组织学观察,观察再生神经的通过率以及再生神经的直径及数目比较各组优劣。取手术同侧小腿三头肌去结缔组织后称取湿重和对肌纤维横截面积的测量评价再生神经的情况。结果:术后14周各组大鼠足底溃疡均愈合并有刺痛反应,单纯行复合导管桥接组反应较A、C组迟钝,实验组及自体神经移植组跛行有不同程度的减轻。各组神经导管均已溶解吸收,各组术后14周再生神经均已经长过缺损段,实验组再生神经直径粗大达到正常的神经直径,神经电生理检测发现神经传导功能基本接近正常传导功能。组织学病理切片显示实验组及自体神经移植组均有较多的神经纤维通过长入远端断端并且再生的神经纤维存在错向生长的纤维数目较少,再生神经纤维直径粗细均匀并且直径接近正常、发育成熟,髓鞘发育好,再生神经明显优于单纯导管桥接修复组。小腿三头肌湿重和肌细胞截面积的比较:实验组和自体神经移植组比较P>0.05无统计学意义;实验组和单纯导管桥接修复组比较P<0.05差异有统计学意义;实验组和自体神经移植组均优于单纯导管桥接修复组,P<0.05差异有统计学意义。结论:带三维凝胶状态睫状神经生长营养因子的聚乳酸聚羟基乙酸神经导管能够有效的诱导大鼠坐骨神经再生并长过10mm的缺损,是一种理想的周围神经替代品。本实验为聚乳酸聚羟基乙酸结合三维凝胶CNTF替代自体神经成为周围神经损伤治疗的新的人工材料提供了动物实验依据。
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