【摘 要】
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目的:饲养和繁育α7烟碱型乙酰胆碱能受体（alpha7-nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR）基因敲除杂合子小鼠,鉴定子代小鼠基因型;通过建立α7-nAChR基因敲除小鼠脓毒症模型,探讨α7-nAChR介导胆碱能抗炎通路对脓毒症炎症反应的作用。方法:1.饲养并繁育引进的α7-nAChR基因敲除杂合子小鼠,提取子代小鼠尾部DNA,采用PCR方法检测子代小
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目的:饲养和繁育α7烟碱型乙酰胆碱能受体（alpha7-nicotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR）基因敲除杂合子小鼠,鉴定子代小鼠基因型;通过建立α7-nAChR基因敲除小鼠脓毒症模型,探讨α7-nAChR介导胆碱能抗炎通路对脓毒症炎症反应的作用。方法:1.饲养并繁育引进的α7-nAChR基因敲除杂合子小鼠,提取子代小鼠尾部DNA,采用PCR方法检测子代小鼠的基因型,Western Blot检测小鼠肝脏组织α7-nAChR蛋白的表达,进一步证实PCR鉴定的结果。2.20只无特定病原体SPF级雄性6周龄C57BL/6J小鼠分为C57BL/6J小鼠对照组（A组）和C57BL/6J小鼠脓毒症模型组（B组）;20只雄性6周龄α7-nAChR基因敲除小鼠分为α7-nAChR基因敲除小鼠对照组（C组）和α7-nAChR基因敲除小鼠脓毒症模型组（D组）。B组和D组小鼠应用盲肠结扎穿刺（cecum ligation and puncture,CLP）进行脓毒症造模,4组小鼠分别于造模前1h、造模后第6h、12h、24h、36h时,尾静脉取血,ELISA检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）的含量,并观察小鼠48h的生存情况,统计并分析各组死亡率。结果:1.成功获得子代α7-nAChR基因敲除纯合子小鼠（α7-nAChR-/-）,α7-nAChR基因敲除杂合子小鼠繁育的子代小鼠纯合率为37%。2.成功建立CLP脓毒症模型。ELISA检测结果显示:A组和C组小鼠血清炎症因子TNF-α、IL-6的含量无明显变化;B组和D组小鼠血清炎症因子TNF-α、IL-6的含量于造模后开始,随时间延长逐渐升高,TNF-α的含量约造模后12h时达到高峰,IL-6的含量约造模后36h时达到峰值;相较B组,D组小鼠血清炎症因子TNF-α、IL-6的水平上升趋势更为明显;观察时间范围内,A组和C组小鼠无死亡,D组小鼠8只死亡（死亡率80%）,明显高于B组（死亡率50%）。结论:1.成功从α7-nAChR基因敲除杂合子小鼠繁育的子代小鼠中筛选出α7-nAChR基因敲除纯合子小鼠,为后续研究提供了理想的动物模型。2.成功建立小鼠脓毒症模型,通过对比不同组小鼠生理状态、血清指标及死亡率,表明α7-nAChR基因的缺失可加重脓毒症小鼠的炎症反应以及增加脓毒症小鼠的死亡率。
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目的通过观察血浆透析滤过（PDF）和血浆置换（PE）模式治疗肝衰竭患者,探讨PDF模式在清除肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素（IL）-1,6,8方面的作用,为临床肝衰竭患者提供更多人工肝支持治疗模式的选择,提供更多实验室依据。方法1.收集2014年8月至2016年3月在杭州市西溪医院住院诊断为肝衰竭并接受人工肝治疗的患者共计40例,其中PDF组30例,对照组PE组10例。2.采用酶联免疫
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目的研究去肾交感神经术（RDN）对自发性高血压大鼠（SHR）心室肥厚的影响。验证RDN对SHR大鼠血压调节作用,探索其抗心室肥厚的时间效应及其分子机制。方法将40只约12周龄的雄性SHR大鼠随机分成3组:手术组（n=16）;假手术组（n=12）;无手术对照组（n=12）,另取6只约12周龄雄性WKY大鼠作为正常血压大鼠。适应性饲养2周后（术前1周各组测血压）,手术组大鼠用苯酚与无水酒精按1:9的比
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目的根据美国国立卫生研究院（NIH）统计,美国每年约有超过5万例手术使用子宫肌瘤粉碎器[1],而2014年FDA表示:在腹腔镜下行子宫平滑肌瘤剔除术时,子宫肌瘤粉碎器可能使隐匿的恶变组织种殖播散,造成严重后果,因此不建议继续使用子宫肌瘤粉碎器[2]。但国内尚未出现统一的指南,美国国内对于FDA意见的反应也是不尽相同,如美妇科腔镜协会（AAGL）[3]就提出子宫肌瘤粉碎器对于育龄期妇女,恶性病变的发
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