基于新型纳米材料的致病菌检测方法研究

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本课题主要研究基于新型纳米材料检测致病菌的技术。近年来,食品安全事故层出不穷,其中,食源性致病菌快速检测亦一直是研究关注的焦点。致病菌快速检测是采用微生物学、化学、生物化学、生物物理、免疫学的方法对食品及其加工、贮藏等环境中的致病菌进行分离、检测、鉴定和计数。现在广泛使用的检测方法主要有:平皿培养法,聚合酶链式反应,荧光PCR检验方法与ELISA酶联免疫吸附试验等,然而,这些方法在食品安全检测中也都有其检测上的不足,如平皿培养法操作繁琐,检测周期长,PCR的检测的假阳性高,ELISA需要的代价较高等。本课题首先制备出具有较好的生物特异性和分散性的生物相容性免疫化超顺磁性纳米磁珠;具有较好的荧光性与生物特异性的生物相容性免疫量子点。然后基于上述两种材料,结合现有的生物学技术,作了相应研究,发展出系列基于新型纳米材料的致病菌检测方法:1.免疫磁性富集免疫荧光标记快速检测致病菌;2.磁性分离富集核酸-PCR扩增检验致病菌;3.将新型纳米材料与现有的荧光原位杂交的方法相结合,建立了量子点标记荧光原位杂交检测致病菌的技术。运用上述的几种方法,对常见的致病菌:沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、阪崎肠杆菌等进行了检验,并与常用的致病菌检测方法比较,验证这些方法的可行性。从而将新型纳米材料制备技术与生物学技术相结合,丰富医疗卫生领域致病菌检测手段。
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