【摘 要】
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干扰素作为一种具有广谱抗病毒和免疫调节等活性的细胞因子,是一种良好的抗病毒和抗球虫制剂及免疫增强剂,可应用于养鸭生产.为开展北京鸭干扰素类生物制剂的研究,作者从Con
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干扰素作为一种具有广谱抗病毒和免疫调节等活性的细胞因子,是一种良好的抗病毒和抗球虫制剂及免疫增强剂,可应用于养鸭生产.为开展北京鸭干扰素类生物制剂的研究,作者从Con A刺激的北京鸭脾淋巴细胞中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增获得北京鸭IFN-γcDNA.测序分析表明所克隆的序列全长495个核心苷酸,包含一个完整的开放阅读框ORF,共编码164个氨基酸的前体蛋白,N末端有1个氨基酸的信号肽,成熟蛋白145个氨基酸.推测其分子量约为17KD.与国外报道的DuIFN-γcDNA(AF087134)同源99.5﹪,存在两个非同义变异,导致氨基酸序列的差异,根据国际干扰素命名委员会的规定确定为一种新亚型DuIFN-γ,命名为DuIFN-γ2,推测序列的变异不会导致活性的改变.从北京鸭肝脏中提取基因组DNA,通过PCR法扩增得到了北京鸭IFN-α基因.序列分析表明序列全长为597个核苷酸,包含一个完整的无内含子DuIFN-α基因,共编码191个氨基酸的蛋白,N末端的30个氨基酸构成信号肽,成熟蛋白为161氨基酸,推测其分子量大小为21.65KD.北京鸭IFN-α核苷酸序列与已报导的鸭IFN-α核苷酸序列(X84764)相比,仅存在一个点变异,核酸水平同源性99.8﹪.上述研究为基因工程生产北京鸭干扰素奠定了基础.
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