疲劳是一种复杂的生理现象,可引起官兵作业作战能力减退,可导致一般人群工作效率降低、差错事故增多。疲劳产生后,若不能及时恢复,就可能造成亚健康状态;不断累积,可能引发“过度训练综合征”、“慢性疲劳综合征”等,使机体内分泌紊乱、免疫力下降,甚至出现器质性病变,威胁人类健康。服用增强运动耐力,促进疲劳恢复的药物,是抗疲劳的有效措施之一。寒冷、高温都会影响体内代谢,是影响部队战斗力的恶劣环境因素,严重的还会导致心脏及大脑供氧不足而死亡。缺氧是指机体生命活动所需的氧不能得到充足的供给,可诱发机体各系统功能改变,威胁人体健康。因此延缓疲劳的发生和耐寒耐热耐缺氧的药物一直是军事医学及运动医学等学科的研究重点。本实验对药材枳椇子（Semen Hoveniae）进行提取,研究枳椇子水提取物（Hoveniadulcis Thunb extract HTE）增加机体耐寒耐热耐缺氧及抗疲劳作用,并测定其所含的总黄酮及槲皮素含量,为研发具有耐寒耐热耐缺氧抗疲劳功效的军用特需药物提供实验依据。本实验用纯净水对枳椇子药材进行提取,并经醇沉。雄性昆明小鼠随机分为:空白对照组、模型组、阳性对照组（诺迪康胶囊280mg/kg）及低、中、高（50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg）3个剂量给药组。连续给药后,采用高温刺激、寒冷刺激、常压缺氧、亚硝酸钠中毒缺氧、急性脑缺血缺氧及减压缺氧,爬竿、爬网、游泳等模型考察枳椇子水提取物对动物耐寒耐热耐缺氧抗疲劳能力的影响。检测小鼠耐力运动时间;取肝脏及肌肉检测糖原含量,考察枳椇子水提取物对小鼠糖原储备量的影响;耐力实验后检测机体生化指标的变化情况。用H₂O₂刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞相对活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用比色法,以芦丁为对照品,测定提取物中的总黄酮含量。制备枳椇子水提物片剂,采用HPLC法对提取物片剂的槲皮素含量进行测定。耐寒耐热实验证明,枳椇子水提取物高剂量组显著延长小鼠在寒冷、高温条件下的存活时间。缺氧实验中枳椇子水提取物延长小鼠常压缺氧、亚硝酸钠中毒缺氧、急性脑缺血缺氧等条件下的存活时间,并且能够抵抗因减压缺氧造成的机体生化指标的改变。细胞实验证明,枳椇子水提耿物显著提高H₂O₂损伤PC12细胞存活率,降低细胞凋亡及死亡比率。抗疲劳实验中,枳椇子水提取物能够延长小鼠爬杆、爬网、游泳时间,并且增加机体糖原储备。在长时间运动后,动物体内血红蛋白含量,乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶总抗氧化能力均降低,丙二醛含量增加。枳椇子水提取物能够显著逆转上述生化指标的改变,增加动物体内血红蛋白含量,提高乳酸脱氢酶,超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶活性,增强总抗氧化能力,减少脂质过氧化产物丙二醛的生成。枳椇子水提取物抵抗H₂O₂引起的PC12细胞凋亡,降低细胞凋亡率。枳椇子水提取物能够以片剂的形式制剂,可以HPLC法测定槲皮素含量作为枳椇子片质量标准中含量测定法。实验结果表明,枳椇子水提取物具有耐寒耐热耐缺氧抗疲劳的功效。其作用机制可能与其提高乳酸脱氢酶,超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶的活性,增加机体糖原储备量,促进自由基的清除有关。因此证明,枳椇子水提取物具有显著氧化损伤的保护作用及抗疲劳作用。枳椇子水提取物能够以片剂的形式制剂。