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1.目的:研究六味补气方对COPD模型大鼠EOS和相关炎症因子及Notch/STAT信号通路的影响及其可能的作用机制,探究六味补气方治疗COPD的作用靶点及分子生物学机制,为六味补气方的临床应用提供理论依据。2.方法:选取鼠龄为42-49天的健康SD雄性大鼠60只,按随机数字表法分为正常对照组（NC）、模型组（MC）、桂龙咳喘宁组（GL）及六味补气方低剂量组（LL）、中剂量组（LM）、高剂量组（LH）,每组10只。除NC组外,其余各组大鼠分别于实验的第1天和第14天采用气管内滴入脂多糖（LPS）加烟熏双因素联合制作COPD实验动物模型,造模时间4周。于造模第5周第1天开始灌胃干预,每日1次,持续15天。NC组和MC组大鼠分别灌服生理盐水10ml/（kg·d）,GL组大鼠灌服桂龙咳喘宁片混悬液0.51g/kg·d（相当于成人常规临床用量的6.25倍）,LH、LM、LL组大鼠分别灌服六味补气方混悬液1.04g/kg·d、0.52g/kg·d、0.26g/kg·d（相当于成人常规临床用量的12.5、6.25、3.12倍）。每天观察大鼠生物学特性变化。于造模第4周和药物干预结束后测定肺功能,HE染色观察肺组织病理学改变,瑞士-姬姆萨染色观察肺泡灌洗液（BALF）涂片中EOS与中性粒细胞计数比值变化,ELISA法检测血清、BALF中IL-3、IL-5、GM-CSF、ECP、Eotaxin、TGF-β 水平,Western Blot 法检测肺组织 Notch、STAT 蛋白量,qRT-PCR 法检测 Notch、STAT mRNA 水平。3.结果3.1生物学特性变化NC组大鼠精神良好,毛发亮泽,呼吸、抓鼻均正常,大鼠体重稳步增加;与NC相比,MC组大鼠出现喉间及气道痰鸣音、咳嗽咳喘,食欲降低,神疲倦嗜卧,毛发枯槁无泽,脱毛明显、活动减少等表现。各药物干预组大鼠一般情况和呼吸系统症状均得到不同程度改善,其中以LH组改善最为明显。3.2肺功能变化与 NC 组相比,MC组大鼠 FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC（%）和PEF 值均明显下降（P＜0.05）;与MC组相比,GL组和六味补气方各剂量组大鼠FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC（%）和PEF值均明显增高（P＜0.05）;与GL组相比,LL组大鼠 FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC（%）和 PEF 值下降（P＜0.05）,LM 组 FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC（%）和 PEF 值无显著变化（P＞0.05）,LH 组 FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC（%）和 PEF 值增高（P＜0.05）;与 LH 组相比,LM、LL 组 FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC（%）和 PEF 值下降（P＜0.05）。3.3肺组织病理学变化NC组大鼠气管及各级支气管管腔正常,黏膜上皮完整、纤毛规则,未见倒伏、粘连;无腺体肥大增生及粘液分泌、炎性细胞浸润;肺泡形态均匀,肺泡壁、肺泡隔未见异常。与NC组相比,MC组大鼠气管及支气管腔变窄,黏膜上皮出现破损,甚至坏死剥落,纤毛倒伏、粘连;杯状细胞及腺体显著增生,支气管黏膜下层增生肥厚,细支气管、肺泡管变窄,部分管腔伴粘液栓形成。可见肺泡壁变薄,肺泡腔扩大,肺泡萎陷相互融合构成肺大疱,肺泡数目明显减少;肺间质和肺实质可见大量淋巴细胞浸润。与MC组相比,各药物干预组大鼠肺组织病理学变化有不同程度改善,气道炎性细胞浸润减轻,粘液栓形成及肺泡破坏数目减少。其中以LH组改善最为明显。3.4 BALF涂片瑞氏-姬姆萨染色及EOS计数各组大鼠BALF涂片经瑞氏-姬姆萨染色后,光镜下观察可见核分叶呈S形或不规则形、着色较浅、胞质内含有鲜红色的嗜酸性颗粒的EOS。与NC组相比,MC组大鼠BALF涂片中EOS、中性粒细胞计数百分比明显增加（P＜0.05）;与MC组相比,GL组和六味补气各剂量组大鼠BALF涂片中EOS、中性粒细胞计数百分比明显减少（P＜0.05）;与GL组相比,LL组大鼠BALF涂片中EOS、中性粒细胞计数百分比增多（P＜0.05）,LM组大鼠BALF涂片中EOS、中性粒细胞百分比无显著变化（P＞0.05）,LH组大鼠BALF涂片中EOS、中性粒细胞计数百分比减少（P＜0.05）;与LH组相比,LM、LL组大鼠BALF涂片中EOS、中性粒细胞计数百分比增加（P＜0.05）。3.5 血清、BALF 中 IL-3、IL-5、GM-CSF、ECP、Eotaxin、TGF-β 水平与NC组相比，MC组大鼠血清、BALF中IL-3 IL-5.GM-CSF ECP.EotaxinTGF-β水平显著升高（P＜0.05）:与MC相比，GL组和六味补气方各剂量组大鼠血清、BALF 中IL-3、IL5、GM-CSF、ECP、Eotaxin、TGF-β水平均显著降低（P＜0.05）;与 GL 组相比，LL 组大鼠血清、BALF 中IL-3、IL-5、GM-CSECP、Eotaxin、TGF-β水平均升高（P＜0.05），LM组大鼠血清、BALF中IL-3、IL-5、GM-CSF、ECP、Eotaxin、TGF-β水平无显著变化（P＞0.05）、LH 组大鼠血清、BALF 中IL-3、IL-5、GM-CSF、ECP、Eotaxin、TGF-β水平下降（P＜0.05）;与LH组相比 LMLL组大鼠血清 BALF.IL3 IL.5 GMCSF ECP EotaxinTGF-β水平升高（p＜0.05）。3.6 肺组织中 Notch、STAT 通路相关分子蛋白表达量与NC 组相比，MC组大鼠肺组织中Notch1、Notch3、STAT3、STAT5表达明显上调（P＜0.05）;与MC组相比，GL组和六味补气方各剂量组大鼠肺组织中Notch1、Notch3、STAT3、STATS 表达明显下调（P＜0.05）:与GL组相比，LL组大鼠肺组织中 Notch1、Notch3、STAT3、STAT5 表达上调（P＜0.05），LM组大鼠肺组织中 Notch1、Notch3、STAT3、STAT5 表达无显著变化（P＞0.05），LH组大鼠肺组织中Notch1、Notch3、STAT3、STAT5表达下调（p＜0.05）;与LH组相比，LL、LM组大鼠肺组织中 Notch1、Notcl3、STAT3、STATS 表达上调（p＜0.05）。3.7 肺组织中 Notch、STAT:通路相关分子mRNA水平与NC组相比，MC组太鼠肺组织中Notch1、Notch3、STAT3、STAT5 mRNA表达明显上调（P＜0.05）;与MC组相比，GL 组和六味补气方各剂量组大鼠肺组织中Notch1、Notch3、STAT3、STAT5 mRNA表达明显下调（P＜0.05）;与GL组相比，LL组大鼠肺组织中 Notch1、Notch3、STAT3、STAT5mRNA表达上调（P＜0.05），LM组大鼠肺组织中 Notch1、Notch3、STAT3、STAT5mRNA 表达无显著变化（P＞0.05）LH维大鼠肺组织中Notch1、Notch3.STAT3.STATS mRNA表达下调（P＜005）:与LH组相比，LL，LM组大鼠肺组织中Notch1、Notch3STAT3、STAT5 mRNA表达上调（p＜0.05）。4.结论4.1 六味补气方可以改善COPD 模型大鼠肺组织病理学变化。减轻气道炎症及增加肺功能。4.2 六味补气方对COPD模型大鼠 EOS 及其相关炎症因子具有抑制作用，其作用机制与下调 NotchISTAT 信号通路表达有关。