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黄芩苷(baicalin)是从黄芩根部分离出来的主要活性成分之一,安胎作用显著。本试验以小鼠胚胎为研究对象,在 CZB培养基中添加不同浓度黄芩苷,以探讨黄芩苷是否可以提高体外培养小鼠胚胎卵裂率、囊胚发育率、囊胚细胞数和囊胚质量,并通过胚胎发育重要基因的表达量变化来评价囊胚质量,揭示黄芩苷促进体外培养小鼠胚胎发育的机制。 实验选用体内和体外培养的小鼠胚胎,分别设对照组以及在培养基中添加黄芩苷(2、4和8μg/mL)实验组,观察并记录2-和4-细胞卵裂率,桑葚胚和囊胚发育率,囊胚细胞数。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组胚胎发育相关基因GJA1和CDH1,应激相关基因HSP70,凋亡相关基因BAX和BCL-2,DNA甲基转移酶基因DNMT1和DNMT3a表达。结果发现,与体内对照组比,体外培养胚胎各阶段发育率极显著降低(P<0.01),添加黄芩苷后,与体外对照组比,2和4μg/mL黄芩苷显著提高胚胎各阶段的发育率(P<0.05),其中,4μg/mL黄芩苷组囊胚发育率(78.6±4.08%)极显著(P<0.01)高于2μg/mL黄芩苷组(63.8±2.56%)和体外对照组(53.7±3.45%),低于(P<0.01)体内对照组(90.3±5.07%)。而且,与体外对照组和其他黄芩苷组比,4μg/mL黄芩苷显著提高囊胚细胞数(P<0.05),并接近体内组囊胚细胞数。与体内对照组比,体外培养囊胚中GJA1,CDH1和BCL-2基因表达量下降,而HSP70,BAX和DNMT1基因表达量升高。添加黄芩苷后,与体外对照组比,黄芩苷显著上调 GJA1,CDH1,BCL-2和DNMT3a基因表达,下调HSP70,BAX和DNMT1基因的表达。 上述结果说明,体外培养环境可改变胚胎发育重要基因表达,从而影响囊胚质量;而黄芩苷通过降低细胞凋亡和HSP70基因表达,促进DNA甲基化,提高体外培养胚胎发育能力。