论文部分内容阅读
目的:探讨转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β1)在食管癌中的作用及其对上皮间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的调控。方法:利用TGF-β1受体抑制剂LY2109761处理食管癌Eca109细胞,根据浓度梯度(0、0.1、1、10μm/ml)分为四组;慢病毒转染TGF-β1干扰RNA(siRNA)处理食管癌Eca109细胞,分为3组:实验组(病毒稳定TGF-β1 si RNA转染Eca109细胞)、阴性对照组(转染无关序列Eca109细胞)、空白对照组(正常未经任何处理的Eca109细胞),采用荧光定量PCR(Quantitative Realtime-PCR,qRT-PCR)技术检测TGF-β1及上皮间质转化(EMT)相关指标E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Snail)在mRNA水平表达情况;Western blot技术检测E-cadherin、Vimentin蛋白水平的表达;同时通过细胞增殖实验(MTT)、细胞划痕实验及Transwell法分别检测细胞增殖、迁移、侵袭的变化情况。结果:通过TGF-β1受体抑制剂(0、0.1、1、10μm/ml)处理Eca109细胞后,在mRNA水平TGF-β1表达逐渐降低,E-cadherin表达逐渐升高,Vimentin、Snail表达逐渐降低(P<0.05);在蛋白水平,E-cadherin表达逐渐升高,Vimentin表达逐渐降低(P<0.05);此外,细胞增殖和迁移能力逐渐降低(P<0.05)。通过慢病毒转染TGF-β1 si RNA后发现,实验组与空白对照组和阴性对照组相比,TGF-β1 mRNA表达降低(P<0.05),E-cadherin表达增高,Vimentin表达降低;同时实验组细胞增殖、迁移和侵袭能力均降低(P<0.05)。结论:TGF-β1可能通过上皮间质转化促进食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。