目的：恶性肿瘤的转移不是随机的，具有一定的器官倾向性，这与器官的微环境有着密切关系。研究表明骨骼肌细胞微环境中存在一种低分子天然抑瘤物质(Low Molecular Weight Natural Tumor Suppressor，LMW-NTS)，是骨骼肌转移瘤罕见性的重要原因。心肌与骨骼肌同属于横纹肌，发生转移瘤的几率也很低。前期的实验已证实心肌细胞培养液(Cardiac Muscle Cell Conditioned Medium，CMCM)在体外能抑制实体肿瘤鼻咽癌细胞的生长，推测CMCM中可能含有某种(些)抑制肿瘤生长的物质，这种(些)物质对肿瘤细胞的生长有特异性的抑制作用，对正常细胞却没有影响。本实验拟通过研究CMCM对急性早幼粒细胞白血病(Acute Promyelocytic Leukemia，APL)细胞株NB4细胞(具有染色体t(15，17)易位并表达PML-RAR α融合蛋白)、慢性粒细胞白血病(Chronic Myelogenous Leukemia，CML)急变细胞株K562细胞(具有Ph染色体和bcr/abl融合基因特征)增殖的影响来观察心肌细胞微环境对非实体肿瘤白血病细胞生长的影响，进一步探讨心肌微环境因素抗白血病细胞的可能机制，为CMCM成为新的生物因子制剂治疗白血病提供实验基础和理论依据。 方法:采用酶解法原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞，原代培养的细胞达到对数生长期后更换新鲜培养液，继续培养24小时后收集上清液即CMCM。设空白对照组(10％DMEM)、阳性对照组三氧化二砷(arsenic trioxide，As2O32.0μmol/l)及不同倍比稀释浓度点(1:1，1:2，1:4，1:8，1:16)的CMCM。各组中细胞浓度均为2×105/ml，置于37℃、5％CO2的饱和湿度孵箱中悬浮培养5天。 ①取对数生长期的NB4细胞、K562细胞，调细胞浓度为5x104/ml，用96孔培养板培养，经不同倍比稀释浓度的CMCM、10％DMEM、2.0umol/L As2O3作用72h后，使用WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒了解NB4细胞、K562细胞体外增殖情况。 ②培养72h后从1:1CMCM组及对照组分别等量取出0.5ml NB4细胞悬液、K562细胞悬液，离心弃上清后取沉渣细胞涂片，使用Wrights-Giemsa染色，在光学显微镜下观察细胞形态学变化，并照相记录。 ③收集第120h1:1CMCM作用后的NB4细胞和正常的NB4细胞，收集第120h1:1CMCM作用后的K562细胞和正常的K562细胞，按照电镜制作要求离心固定，丙酮逐级脱水，包埋，半薄切片光学定位，超薄切片，醋酸铀及枸橼酸铅双重染色，透射电镜观察并照片记录观察。 结果： ①与空白对照组相比，NB4细胞在不同稀释浓度点(1:1，1:2，1:4，1:8，1:16)的CMCM中的细胞存活率(-x±S)分别为(81.41±5.24)％、(84.33±7.20)％、(81.63±5.66)％、(90.46±6.27)％、(92.86±6.21)％；NB4细胞在2.0umol/L As2O3的细胞存活率为(68.71±2.13)％。 ②与空白对照组相比，K562细胞在不同稀释浓度点(1:1，1:2，1:4，1:8，1:16)的CMCM中的细胞存活率(-x±S)分别为(79.37±3.80)％、(85.49±5.33)％、(83.06±3.99)％、(77.68±10.16)％、(86.14±5.50)％；K562细胞在2.0umol/L As2O3的细胞存活率为(52.23±1.56)％。 由以上数据得出CMCM与NB4细胞、K562细胞共同培养后白血病细胞的增殖明显下降，这种作用随CMCM浓度的增加而增强的规律不明显，与空白对照组相比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。CMCM对NB4细胞、K562细胞存活率与AS2O3相比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。各等比稀释浓度点的CMCM之间两两比较差异不显著，可能与稀释浓度太低有关，无明显剂量依赖关系。CMCM对NB4细胞、K562细胞存活率相比较无统计学意义(P＞0.05)。CMCM处理72h后光镜观察发现NB4细胞、K562细胞生长受到明显抑制，在光镜下两组细胞均可见数量明显减少，体积缩小，细胞膜完整，核染色质浓缩聚集，核膜裂解，染色质碎裂，类似凋亡前期表现。CMCM处理120h后电镜下可见NB4细胞、K562细胞核内染色质聚集浓缩，可边集在核膜下，胞质内被大量空泡所充填。出现核碎裂，核膜断裂，线粒体等细胞器破坏，形成类似凋亡小体的改变。 结论：新生大鼠CMCM对NB4细胞、K562细胞的增殖有明显的抑制作用；CMCM抑制NB4细胞、K562细胞的增殖可能是通过细胞凋亡实现的；心肌源性的抑瘤物可能是临床上心肌转移瘤罕见现象的关键因素。