【摘 要】
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背景周围神经损伤（PNI）是一种临床常见疾病,局部受到急性压迫,遭受创伤,都有可能导致神经功能受到损害,进而出现感觉障碍,引发运动异常,带来严重后果,甚至留下终身残疾。目前首选方法仍是自体神经移植,同时自体神经移植也是评价其它替代治疗措施的“金标准”。但是自体神经来源有限,存在增加创伤、遗留供区感觉障碍、神经束支对合匹配不佳等诸多缺点。各类用来治疗周围神经缺损的NGC（Nerve guidance
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背景周围神经损伤（PNI）是一种临床常见疾病,局部受到急性压迫,遭受创伤,都有可能导致神经功能受到损害,进而出现感觉障碍,引发运动异常,带来严重后果,甚至留下终身残疾。目前首选方法仍是自体神经移植,同时自体神经移植也是评价其它替代治疗措施的“金标准”。但是自体神经来源有限,存在增加创伤、遗留供区感觉障碍、神经束支对合匹配不佳等诸多缺点。各类用来治疗周围神经缺损的NGC（Nerve guidance conduit）的材料主要有天然、合成或半合成生物材料。聚乳酸（PLA）由于其良好的生物降解性和热塑加工性能,应用于神经再生组织工程引起了人们的极大关注。但PLA代谢中间产物乳酸在局部堆积会导致局部p H值下降,同时其亲水性差,细胞吸附率低,不利于细胞表面黏附,这些都不利于神经损伤的修复再生。本课题在PLA神经导管的基础上,改进导管材料,以聚乙二醇改性单纯聚乳酸神经导管（PEG-PLA）和由多糖和聚丙烯酰胺水凝胶神经导管（ALG-PAA）修复大鼠坐骨神经缺损,并进行有效性评价。目的为获得促进神经再生的新型神经导管,本课题制备聚乙二醇（PEG）改性聚乳酸（PLA）神经导管,以单纯聚乳酸神经导管作为对照,评价PEG-PLA神经导管和新型多糖-聚丙烯酰胺水凝胶神经导管的生物学性质。方法利用溶剂挥发法制备PLA神经导管支架,用聚乙二醇双丙烯酸酯（PEGDA）通过化学交联的方式对导管内壁进行改性,电镜观察其微观形貌;按《抗凝血材料的双层水凝胶管路及其制备方法》制备多糖-聚丙烯酰胺神经导管（ALG-PAA）;利用CCK-8实验检测大鼠神经施万细胞RSC 96在不同神经导管预处理培养基中的增殖情况;预处理大鼠背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）与不同神经导管,培养基共培养7天后,行神经丝蛋白NF200免疫荧光染色;取SD大鼠40只,随机分为4组:A组为自体神经移植组（ANG）;B组为聚乙二醇改性聚乳酸神经导管组（PEG-PLA）;C组为单纯聚乳酸组（PLA）;D组为多糖-聚丙烯酰胺神经导管组（ALG-PAA）。建立大鼠坐骨神经10 mm缺损模型。手术完成后,观察所有实验动物,术后2周行移植段神经再生速度评价;术后4、8、12周,行坐骨神经功能指数（SFI）测定;术后12周,移植段再生神经组织学评价、腓肠肌恢复率测量和组织学检查。结果PLA和PEG-PLA神经导管表面观为半透明状,支撑性好,电镜下观察PEG-PLA神经导管内部有取向性纹路,各组神经导管的浸提液与SCs和DRG共培养后,SCs和DRG生长无明显差异,提示各组神经导管的生物相容性良好;术后2周,再生神经免疫荧光染色结果提示ALG-PAA组神经修复效果优于PEG-PLA组和PLA组,接近ANG组,PEG-PLA组神经修复效果优于PLA组;术后12周,各组实验动物进行步态分析结果提示ANG恢复效果最好,ALG-PAA次之,PEG-PLA神经导管优于PLA神经导管,但两者SFI差异无统计学意义;对比腓肠肌肌肉湿重恢复率和Masson染色等情况:ALG-PAA神经导管修复坐骨神经缺损效果与自体神经移植相当,能够有效的恢复靶器官体积,单纯PLA神经导管修复坐骨神经缺损效果差,肌肉长期失去神经支配,恢复不良。PEG-PLA神经导管恢复优于PLA神经导管,神经组织学染色结果显示ALG-PAA组明显优于PLA和PEG-PLA神经导管组,而对比自体神经移植效果已较为接近;两组的上述指标对比结果显示,PEG-PLA组优于PLA神经导管组。实验结论PEG-PLA神经导管促进神经再生的效果优于PLA神经导管,提示PEG能改善单纯PLA神经导管的神经修复效果。ALG-PAA神经导管和PEG-PLA神经导管组织相容性都较好,在神经修复效果上ALG-PAA更具有优势,接近ANG的效果。
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