【摘 要】
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海洋特殊的生态环境中蕴含着丰富的微生物资源,海源微生物因其代谢产物结构的新颖性和生物活性的广泛性,越来越受到大家的关注。本研究从辽宁大连黄海海域近海底泥中分离出40株海洋真菌。采用化学筛选和生物活性筛选相结合的方法,发现多株理想菌株。其中菌株DL-16的发酵产物具有显著的抗菌和肿瘤细胞毒活性且代谢产物丰富,通过形态学观察和ITS序列分析,鉴定该菌为真菌Paraconiothyrium sporul
【基金项目】
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国家自然科学基金（81903772）；
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海洋特殊的生态环境中蕴含着丰富的微生物资源,海源微生物因其代谢产物结构的新颖性和生物活性的广泛性,越来越受到大家的关注。本研究从辽宁大连黄海海域近海底泥中分离出40株海洋真菌。采用化学筛选和生物活性筛选相结合的方法,发现多株理想菌株。其中菌株DL-16的发酵产物具有显著的抗菌和肿瘤细胞毒活性且代谢产物丰富,通过形态学观察和ITS序列分析,鉴定该菌为真菌Paraconiothyrium sporulosum。通过检索文献,发现该种目前研究报道较少。因此,确定菌株DL-16为本论文的研究对象。将菌株DL-16进行大规模发酵,有机溶剂提取,获得发酵产物的粗浸膏,综合运用正（反）相硅胶柱色谱以及高效液相色谱等多种色谱方法进行分离纯化,运用四大光谱（NMR,UV,IR,MS）、旋光、ECD、X-ray单晶衍射以及比对文献等方法确定了 20个化合物的结构,其中1-13为艾里莫芬烷型或其变形倍半萜以及倍半萜二聚体,14-16为异香豆素类化合物,17-19为四氢萘酮类化合物,20为蒽醌化合物。值得一提的是1-8,12和13为新化合物,本论文首次报道了源自微生物的艾里莫芬烷型倍半萜二聚体。对分离得到的化合物分别进行了抗真菌、抗细菌、肿瘤细胞毒活性及抗炎活性测试。5和8有微弱的抗真菌活性。2,3,5-10对多株测试细菌具有不同程度的抗菌活性（由于样品量原因,1,4,11-13未参加筛选）,非倍半萜14-20均无抗菌活性。说明艾里莫芬烷型倍半萜是该菌发酵产物抗菌活性成分。8对胃癌细胞AGS有微弱的细胞毒活性。2-10对LPS诱导的BV-2细胞NO的产生呈现不同程度的抑制活性,其中2-5,8和10具有显著的抗炎活性,IC50值为2.8±0.5-8.1±3.5μM,其活性和阳性对照药姜黄素相当（8.6±1.6μM）,且在50 μM浓度下2-10对BV-2细胞均无细胞毒性。综上所述,本论文以真菌P.sporulosum为研究对象,从其发酵产物中分离鉴定了 20个化合物,其中10个为新的艾里莫芬烷型倍半萜,部分化合物具有抗细菌和抗炎活性。本论文弥补了海洋真菌P.sporulosum次生代谢产物研究不足的境况,丰富了艾里莫芬烷型倍半萜的结构类型,为抗菌和抗神经炎药物的研发提供了模式结构。
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